[發明專利]重組腺相關病毒AAV-gas6及應用在審
| 申請號: | 202011307301.0 | 申請日: | 2020-11-19 |
| 公開(公告)號: | CN112522216A | 公開(公告)日: | 2021-03-19 |
| 發明(設計)人: | 邊培育;雷迎峰 | 申請(專利權)人: | 中國人民解放軍空軍軍醫大學 |
| 主分類號: | C12N7/01 | 分類號: | C12N7/01;C12N15/864;A61K35/76;A61P31/14;C12R1/93 |
| 代理公司: | 西安銘澤知識產權代理事務所(普通合伙) 61223 | 代理人: | 崔瑞迎 |
| 地址: | 710032 *** | 國省代碼: | 陜西;61 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 重組 相關 病毒 aav gas6 應用 | ||
1.重組腺相關病毒AAV-gas6,其特征在于,含有SEQ ID NO:1所示的核酸序列。
2.根據權利要求1所述重組腺相關病毒AAV-gas6的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:
S1、使用BglⅡ和xhoⅠ內切酶處理pAAV-MCS載體,然后將所回收片段與同樣用BglⅡ和xhoⅠ雙酶切的SEQ ID NO:1所示的核酸序列連接,得到重組AAV-gas6質粒;
S2、用S1制備的重組AAV-gas6質粒和輔助載體質粒pAAV-RC、pHelper共同轉染腺相關病毒包裝細胞,得到重組腺相關病毒AAV-gas6。
3.根據權利要求2所述的重組腺相關病毒AAV-gas6的制備方法,其特征在于,SEQ IDNO:1所示的核酸序列的獲得方法如下:
對小鼠的組織提取總RNA,逆轉錄為cDNA后,設計合成gas6基因編碼區上、下游引物,并引入限制性內切酶酶切位點BglⅡ和xhoⅠ,PCR擴增得到小鼠gas6表達基因,即SEQ ID NO:1所示的核酸序列;
所述上游引物如SEQ ID NO:2所示,所述下游引物如SEQ ID NO:3所示。
4.根據權利要求3所述的重組腺相關病毒AAV-gas6的制備方法,其特征在于,所述腺相關病毒包裝細胞為AAV-293細胞。
5.權利要求1所述重組腺相關病毒AAV-gas6在制備治療或緩解JEV引起的病毒性腦炎的藥物中的應用。
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