[發明專利]新型冠狀病毒動物模型及應用

有效

• 申請號: 202011301528.4
• 申請日: 2020-11-19
• 公開（公告）號: CN112353951B
• 公開（公告）日: 2022-02-22
• 發明（設計）人: 游富平;王祥喜;秦川
• 申請（專利權）人: 北京大學;中國科學院生物物理研究所;中國醫學科學院醫學實驗動物研究所
• 主分類號: A61K49/00
• 分類號: A61K49/00
• 代理公司: 北京北匯律師事務所 11711
• 代理人: 高元吉

本發明公開新型冠狀病毒動物模型及應用。本發明的動物模型在感染MHV和SARS?CoV?2后，其肺部的免疫反應均表現為抗細菌免疫反應的顯著增強，并能夠引起未成熟中心粒細胞的異常增生，與重癥病人中未成熟中性粒細胞異常增生的結果相一致。這種增生現象是冠狀病毒感染引起的獨有的特征，可以作為冠狀病毒感染程度和疾病進展程度的重要評價指標。通過用小分子藥物本發明的動物模型是新型冠狀病毒肺炎病理狀態和藥物評價的有效模型。

技術領域

本發明涉及領域醫藥領域，具體涉及用于鑒定新型冠狀病毒有用的化合物的動物模型及應用。

背景技術

冠狀病毒是一種以蝙蝠和禽類為主要宿主的單鏈RNA病毒。在近幾十年中，幾種冠狀病毒突破了蝙蝠與人類的物種界限，嚴重危害了人們的生命安全，造成了很大的社會恐慌。

在新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)引起的肺炎中，重癥患者通常會最終發展為不受控制的高強度炎性細胞因子風暴，而這種失控的炎癥不僅不會修復損傷的肺組織反而是冠狀病毒肺炎后期致命性多器官衰竭的元兇。炎癥風暴是從初步少量的炎性細胞因子分泌招募炎癥細胞浸潤活化，然后活化的炎癥細胞進一步分泌炎癥因子一步步信號放大導致的。因此有效的抑制異常的炎癥反應是治療新冠重癥病例的有效策略，而目前在臨床中應用的藥物均不能有效抑制異常炎癥反應。而新藥的開發和研制又遇到了很大的瓶頸，最重要的制約因素有兩個：1. 沒有有效的重癥動物模型，在已知的動物模型中，包括AEC2人源化小鼠、雪貂和猴子，均不能在動物中引起重癥肺炎，因此無法在現有模型中進行針對重癥的藥物評價；2. SARS-CoV-2為安全等級三級的病原生物，絕大部分實驗室，無法滿足操作需求，也就無法進行進一步的生理功能和藥物評價工作。

發明內容

鑒于現有技術中存在的技術問題，發明人應用恒河猴和人源ACE2轉基因小鼠，建立SARS-CoV2肺部感染動物模型，并進一步驗證了該動物模型在藥物篩選或鑒定中的有效性。至少部分地基于此完成了本發明。具體地，本發明包括以下內容。

本發明的第一方面，提供一種用于鑒定對預防、治療或減緩冠狀病毒有用的化合物的方法，其包括將待測化合物施用至具有重癥肺炎表現的動物模型的步驟，其中所述動物模型為IFNAR基因敲除動物。

在某些實施方案中，根據本發明所述的方法，其中，通過感染MHV使所述動物模型具有重癥肺炎表現。

在某些實施方案中，根據本發明所述的方法進一步包括檢測動物模型中未成熟中性粒細胞的步驟。

在某些實施方案中，根據本發明所述的方法，其中，所述動物包括小鼠、雪貂和猴。

在某些實施方案中，根據本發明所述的方法，其中，所述冠狀病毒包括SARS-CoV-2和/或MHV-A59。

在某些實施方案中，根據本發明所述的方法具體包括以下步驟：

(1) 通過感染MHV使所述動物模型具有重癥肺炎表現；

(2) 將待測化合物施用至具有重癥肺炎表現的動物模型；和

(3) 如果動物模型的重癥肺炎表現減輕、緩解或消除，則將所述待測化合物鑒定對預防、治療或減緩冠狀病毒有用的化合物，否則將所述待測化合物鑒定不是對預防、治療或減緩冠狀病毒有用的化合物。

本發明的第二方面，提供一種用于鑒定對預防、治療或減緩冠狀病毒有用的化合物的方法，其包括以下步驟：

(1) 用MHV感染動物模型，然后檢測所述動物模型體內未成熟中性粒細胞增生或活化情況的步驟，其中所述動物模型為IFNAR基因敲除動物；

(2) 將待測化合物施用至感染后的動物模型，然后檢測所述動物模型中未成熟中性粒細胞增生或活化情況的步驟；