[發(fā)明專利]一種T細(xì)胞抗原受體、其多聚體復(fù)合物及其制備方法和應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011296930.8
• 申請日: 2020-11-18
• 公開（公告）號: CN113621071A
• 公開（公告）日: 2021-11-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 賈樂梅;陳花;李文忠;王嘉盛;雷蕾;劉芳;趙學(xué)強(qiáng);林欣
• 申請（專利權(quán)）人: 華夏英泰（北京）生物技術(shù)有限公司;清華大學(xué)
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/85;C12N5/10;A61K39/00;A61P35/00;A61P31/22
• 代理公司: 北京領(lǐng)科知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11690
• 代理人: 徐丹丹;張丹

1.一種T細(xì)胞抗原受體，其特征在于，所述的T細(xì)胞抗原受體特異性結(jié)合EBV潛伏期膜蛋白LMP2，其中，所述LMP2的結(jié)合表位包含SEQ ID NO：5和/或6；

優(yōu)選的，所述的T細(xì)胞抗原受體包含α鏈的CDR1α-CDR3α和β鏈的CDR1β-CDR3β，其中，CDR1α的氨基酸序列如SEQ ID NO：212所示或與SEQ ID NO：212所示氨基酸序列具有至少80％同源性，CDR2α的氨基酸序列如SEQ ID NO：213所示或與SEQ ID NO：213所示氨基酸序列具有至少80％同源性，CDR3α的氨基酸序列如SEQ ID NO：214-215中的任一種或與SEQ IDNO：214-215中任一種所示氨基酸序列具有至少80％同源性，CDR1β的氨基酸序列如SEQ IDNO：217或與SEQ ID NO：217所示氨基酸序列具有至少80％同源性，CDR2β的氨基酸序列如SEQ ID NO：219或與SEQ ID NO：219所示氨基酸序列具有至少80％同源性，CDR3β的氨基酸序列如SEQ ID NO：221、251中的任一種或與SEQ ID NO：221、251中任一種所示氨基酸序列具有至少80％同源性；

進(jìn)一步優(yōu)選的，所述的CDR1α-CDR3α及CDR1β-CDR3β選自下列任一組：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的T細(xì)胞抗原受體，其特征在于，所述的α鏈的氨基酸序列如SEQID NO：31-36所示，或與SEQ ID NO：31-36所示氨基酸序列具有至少80％同源性；所述的β鏈的氨基酸序列如SEQ ID NO：25-30所示，或與SEQ ID NO：25-30所示氨基酸序列具有至少80％同源性；優(yōu)選的，所述的T細(xì)胞抗原受體的氨基酸序列選自SEQ ID NO：19-24中的任一種或與SEQ ID NO：19-24任一種所示氨基酸序列具有至少80％同源性。

3.一種核酸，其特征在于，所述的核酸編碼權(quán)利要求1-2任一所述的T細(xì)胞抗原受體。

4.一種表達(dá)載體，其特征在于，所述的表達(dá)載體包含權(quán)利要求3所述的核酸。

5.一種宿主細(xì)胞或免疫細(xì)胞，其特征在于，所述的宿主細(xì)胞包含權(quán)利要求3所述的核酸或權(quán)利要求4所述的表達(dá)載體，所述的免疫細(xì)胞表達(dá)權(quán)利要求1-2任一所述的T細(xì)胞抗原受體。

6.一種重組T細(xì)胞的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)從陽性T細(xì)胞克隆得到權(quán)利要求3的核酸序列；

2)分離、培養(yǎng)原代T細(xì)胞；

3)將步驟1)得到的核酸序列遞送至步驟2)所述的原代T細(xì)胞中，獲得表達(dá)權(quán)利要求1-2任一所述T細(xì)胞抗原受體的重組T細(xì)胞。

7.一種T細(xì)胞抗原受體的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)從陽性T細(xì)胞克隆得到權(quán)利要求3的核酸序列；

(2)將步驟(1)得到的核酸序列連接至載體骨架，獲得表達(dá)載體；

(3)將步驟(2)獲得的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化至宿主細(xì)胞，然后誘導(dǎo)其表達(dá)；

(4)獲得T細(xì)胞抗原受體。

8.一種多聚體復(fù)合物，其特征在于，所述多聚體復(fù)合物包含權(quán)利要求1-2任一所述的T細(xì)胞抗原受體。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的多聚體復(fù)合物，其特征在于，所述多聚體復(fù)合物還包括單體，生物素分子，以及鏈霉親和素分子或親和素分子，其中，所述單體包括MHC分子α鏈胞外區(qū)和β2m鏈及抗原肽，所述單體與所述生物素分子偶聯(lián)，所述生物素分子與所述鏈霉親和素或親和素分子結(jié)合；優(yōu)選的，所述的抗原肽包含SEQ ID NO：5和/或6，所述的MHC分子為HLA-A*1101。