[發(fā)明專利]一種選擇性檢測醌氧化還原酶1的熒光探針的設(shè)計與合成在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202011296848.5 | 申請日： | 2020-11-19 |
| 公開（公告）號： | CN112322281A | 公開（公告）日： | 2021-02-05 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 顏梅;馬云飛;張晶;孫榮環(huán);馮曉雯;朱彤;魏全勇 | 申請（專利權(quán)）人： | 濟南大學(xué) |
| 主分類號： | C09K11/06 | 分類號： | C09K11/06;G01N21/64;C07D311/16 |
| 代理公司： | 濟南譽豐專利代理事務(wù)所(普通合伙企業(yè)) 37240 | 代理人： | 趙鳳 |
| 地址： | 250022 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 選擇性 檢測 氧化 還原酶 熒光 探針 設(shè)計 合成 | ||
1.用于hNQO1選擇性熒光探針的設(shè)計與合成，其特征是包括以下步驟：
（1）近紅外熒光探針CDCI-hNQO1的合成：①. 分別稱取186 mg(3,5,5-三甲基環(huán)己-2-烯亞基)丙二腈、190 mg 7-羥基-3-醛基香豆素、0.5 ml哌啶和0.5 ml乙酸于3 ml無水乙醇中充分混合并加熱回流4 h，冷卻至室溫后，過濾混合物，并在濃縮濾液。粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化并經(jīng)旋蒸蒸干，得到磚紅色粉末狀CDCI-OH；
②.將245 mg1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽、52 mg4-二甲基氨基吡啶、304 mg CDCI-OH和265 mg醌丙酸添加到8 ml無水DMF中，然后，將混合物在氮氣保護下室溫攪拌5小時，去除溶劑后，經(jīng)硅膠柱層析純化并經(jīng)旋蒸蒸干，得到熒光探針CDCI-hNQO1；
（2）熒光探針分析檢測hNQO1：采用離心法從健康人血液中提取人血清，然后用PBS緩沖液（0.01M，pH=7.4）將人血清稀釋100倍，以通過添加不同濃度的hNQO1制備樣品。探針CDCI-hNQO1分別與不同濃度樣品孵育15分鐘，隨后進行熒光強度檢測。
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