[發(fā)明專利]一種用于生產(chǎn)香紫蘇二醇的菌株組合、應(yīng)用及生產(chǎn)香紫蘇二醇的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202011294167.5 | 申請日： | 2020-11-18 |
| 公開（公告）號： | CN112574897B | 公開（公告）日： | 2022-10-28 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 于洪巍;葉麗丹;何霓 | 申請（專利權(quán)）人： | 浙江大學(xué) |
| 主分類號： | C12N1/19 | 分類號： | C12N1/19;C12N1/14;C12N15/81;C12P39/00;C12P7/02;C12R1/865;C12R1/645 |
| 代理公司： | 杭州天勤知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33224 | 代理人： | 沈金龍 |
| 地址： | 310013 浙江*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 用于 生產(chǎn) 紫蘇 菌株 組合 應(yīng)用 方法 | ||
1.一種生產(chǎn)香紫蘇二醇的方法，其特征在于，使用用于生產(chǎn)香紫蘇二醇的菌株組合進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，生產(chǎn)香紫蘇二醇，
所述菌株組合由釀酒酵母工程菌和保藏號為ATCC 20624的真菌組成，所述釀酒酵母工程菌中外源表達(dá)焦磷酸賴百當(dāng)烯二醇酯合酶和香紫蘇醇合酶，
釀酒酵母工程菌的構(gòu)建步驟如下：
(1)將核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的焦磷酸賴百當(dāng)烯二醇酯合酶基因和核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的香紫蘇醇合酶基因轉(zhuǎn)入底盤釀酒酵母YXWP120中進(jìn)行表達(dá)；
(2)將步驟(1)所得釀酒酵母中啟動Erg9基因表達(dá)的啟動子替換為弱啟動子pHXT1，實現(xiàn)Erg9基因表達(dá)的下調(diào)；
(3)將步驟(2)所得釀酒酵母中的rox1基因敲除，獲得所述釀酒酵母工程菌，
共培養(yǎng)時，真菌ATCC 20624與所述釀酒酵母工程菌的菌量混合比例為1∶2～2∶1。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，分別將釀酒酵母工程菌和保藏號為ATCC20624的真菌進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)獲得預(yù)培養(yǎng)液，真菌ATCC 20624預(yù)培養(yǎng)時外源添加0.05-0.15g/L香紫蘇醇作為誘導(dǎo)劑，然后將兩種菌株的預(yù)培養(yǎng)液混合后進(jìn)行共培養(yǎng)。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，發(fā)酵培養(yǎng)結(jié)束后，發(fā)酵液用乙酸乙酯萃取分離香紫蘇二醇，萃取后取乙酸乙酯所在部分進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，獲得香紫蘇二醇。
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