[發明專利]一種提高毛木耳中漆酶含量的方法

有效

• 申請號: 202011293694.4
• 申請日: 2020-11-18
• 公開（公告）號: CN112359026B
• 公開（公告）日: 2022-08-19
• 發明（設計）人: 孟麗;李壯;王琦;柏曉冉;張少巖;王威;王麗;王慶佶;呂曉萌
• 申請（專利權）人: 山東農業大學;吉林農業大學
• 主分類號: C12N9/02
• 分類號: C12N9/02;C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 李圣梅

本發明屬于食用菌發酵技術領域，具體涉及一種提高毛木耳中漆酶含量的方法，本發明提供一種誘導物，所述誘導物為麥麩汁；在有氧及避光條件下，含有碳源、氮源及無機組分的無菌發酵培養基中培養毛木耳，發酵培養基由葡萄糖、麥芽糖、酵母粉、蛋白胨、磷酸二氫鉀、七水合硫酸鎂、及麩皮汁組成，能夠在短時間內發酵獲得較高活性的漆酶，漆酶的發酵周期縮短，顯現出廣闊的應用潛力。

技術領域

本發明屬于食用菌發酵技術領域，具體涉及一種提高毛木耳中漆酶含量的方法。

背景技術

公開該背景技術部分的信息僅僅旨在增加對本發明的總體背景的理解，而不必然被視為承認或以任何形式暗示該信息構成已經成為本領域一般技術人員所公知的現有技術。

大量研究表明，白腐真菌由于其產生非特異性胞外酶，如木質素分解酶系統中的漆酶、錳過氧化物酶和木質素過氧化物酶等，可用于秸稈降解，生物漂白以及污染物的治理，降解有毒化合物的能力具有廣泛的底物特異性，可以降解代謝多種化學物質，包括化學合成染料。使得白腐真菌在工業和生活方面的應用研究受到廣泛重視，顯現出廣闊的應用潛力。

漆酶，是一種含四個銅離子的多酚氧化酶，作為一種綠色催化劑，其催化底物廣，且大多數催化反應的唯一產物為水，這一優良性能使其廣泛應用于各個領域。實際應用于生產的漆酶主要來源于真菌和細菌，國內外的主要生產菌株為白腐真菌。毛木耳Auricularia cornea隸屬于木耳科木耳屬，是較為常見的白腐真菌，木質素酶產酶能力較強。但自然條件下生長的菌株漆酶產量及漆酶活力普遍較低，若能在毛木耳發酵過程中提高毛木耳漆酶產量，獲得性能優良的漆酶，開發漆酶的應用研究具有重要意義。因此，目前需要解決的一個關鍵性問題是如何在控制成本的前提下提高漆酶的產量。

發明內容

在為了解決上述問題，本發明提供一種提高毛木耳中漆酶含量的方法，通過研究發現，在毛木耳液體培養基中添加適宜含量的麥麩汁，能有效促進毛木耳漆酶的生物合成，顯著提高毛木耳發酵液中漆酶含量，因此具有良好的實際應用之價值。

本發明采用的技術方案如下：

本發明第一方面，提供一種提高毛木耳中漆酶含量的誘導物，所述誘導物為麥麩汁。

本發明第二方面，提供一種提高毛木耳中漆酶含量的方法，包括以下步驟：

（1）菌絲體培養：在無菌環境下接種毛木耳菌塊至母種培養基培養皿中央，黑暗條件下培養；

（2）誘導物篩選：在250 mL錐形瓶中加入CYM誘導培養基后滅菌處理，在無菌環境下接種菌塊，振蕩條件下培養，發酵液離心后取上清液即得粗酶液，用于漆酶酶活測定；

所述CYM誘導培養基的配制方法為：將1%麥芽糖、2%葡萄糖、0.2%酵母提取物、0.2%蛋白胨、 0.46%KH₂PO₄、0.05%MgSO₄·7H₂O，20g誘導物煮5min后加水定容至100mL，配成20%（W/V）的CYM誘導培養基。

本發明第三方面，提供上述方法在染料降解、木質素／纖維素降解、生物漂白、生態修復等領域的應用。

本發明的一個或多個具體實施方式至少取得了以下技術效果：

（1）在有氧及避光條件下，含有碳源、氮源及無機組分的無菌發酵培養基中培養毛木耳，發酵培養基由葡萄糖、麥芽糖、酵母粉、蛋白胨、磷酸二氫鉀、七水合硫酸鎂、及麩皮汁組成，能夠在短時間內發酵獲得較高活性的漆酶，漆酶的發酵周期縮短，在發酵前期即可進行純化，便于投入到工業生產，降低生產成本；