[發明專利]一種隨機打斷DNA的方法有效
| 申請號： | 202011289430.1 | 申請日： | 2017-12-30 |
| 公開（公告）號： | CN112375807B | 公開（公告）日： | 2023-02-21 |
| 發明（設計）人： | 潘偉業;程世月;王亞蕾;彭瓊芳;玄兆伶;李大為;梁峻彬;陳重建 | 申請（專利權）人： | 浙江安諾優達生物科技有限公司;安諾優達基因科技（北京）有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6806 | 分類號： | C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 北京彩和律師事務所 11688 | 代理人： | 閆桑田;劉磊 |
| 地址： | 322000 浙江省金華市義*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 隨機 打斷 dna 方法 | ||
1.一種隨機打斷DNA的方法，其包括：
在二價陽離子、非離子表面活性劑、以及一價鹽的存在下，使用非限制性內切酶對DNA分子進行打斷，其中，
所述二價陽離子為選自鈣離子、鎂離子中的一種或兩種，所述二價陽離子的使用濃度為0.05mM～0.1mM；
所述非離子表面活性劑的使用濃度為0.01％～0.2％；
所述一價鹽中的金屬離子為選自鈉離子、鉀離子中的一種或兩種，所述一價鹽的使用濃度為50mM～200mM；
所述非限制性內切酶為選自DNAse I、不耐熱蝦DNAse、HL-dsDNase、dsDNase中的一種或兩種以上。
2.根據權利要求1所述的方法，其中，
所述非離子表面活性劑為選自TritonX-100、Tween-20、Tween-80中的一種或兩種以上。
3.根據權利要求1所述的方法，其中，
所述一價鹽的使用濃度為50mM～100mM。
4.一種隨機打斷DNA的方法，其包括：
在二價陽離子、隨機DNA雙鏈結合蛋白質、以及非離子表面活性劑的存在下，使用非限制性內切酶對DNA分子進行打斷，其中，
所述二價陽離子為選自鈣離子、鎂離子中的一種或兩種，所述二價陽離子的使用濃度為0.05mM～0.1mM；
所述隨機DNA雙鏈結合蛋白質為sso7d蛋白質，所述隨機DNA雙鏈結合蛋白質的使用濃度為3ng/μL～6ng/μL；
所述非離子表面活性劑的使用濃度為0.01％～0.2％；
所述非限制性內切酶為選自DNAse I、不耐熱蝦DNAse、HL-dsDNase、dsDNase中的一種或兩種以上。
5.根據權利要求4所述的方法，其中，
所述非離子表面活性劑為選自TritonX-100、Tween-20、Tween-80中的一種或兩種以上。
6.根據權利要求4所述的方法，其中，
所述隨機DNA雙鏈結合蛋白質的使用濃度為4ng/μL～6ng/μL。
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