[發明專利]分泌抗FGF18單克隆抗體雜交瘤細胞株及其單抗、應用

有效

• 申請號: 202011286239.1
• 申請日: 2020-11-17
• 公開（公告）號: CN113151185B
• 公開（公告）日: 2023-06-23
• 發明（設計）人: 莊光磊;臧榮余;狄文
• 申請（專利權）人: 蘇州仁端生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: C12N5/20
• 分類號: C12N5/20;C07K16/22;G01N33/577;G01N33/543;G01N33/58;G01N33/574
• 代理公司: 北京科家知識產權代理事務所(普通合伙) 11427
• 代理人: 宮建華

本發明技術提供的分泌抗FGF18單克隆抗體雜交瘤細胞株，分泌抗FGF18單克隆抗體雜交瘤細胞株，雜交瘤細胞株為2C5D6或/和3E4F7，保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏號為CGMCC?NO.C202091或/和CGMCC?NO.C202092。本發明還提供分泌抗FGF18單克隆抗體雜交瘤細胞株分泌的單克隆抗體；以及提供了含有所述單克隆抗體的試劑盒；本發明的單克隆抗體能在制備檢測FGF18蛋白試劑中應用。本發明通過獲得分泌抗FGF18單克隆抗體雜交瘤細胞株，獲得針對FGF18不同抗原表位的單克隆抗體2種，特異性強且靈敏度高，可通過配對檢測體液(如血液、尿液等)中FGF18蛋白含量，應用于檢測FGF18蛋白過量表達或診斷以FGF18蛋白異常表達為表征的疾病的產品的應用。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，特別涉及FGF18單克隆抗體雜交瘤細胞株。

背景技術

成纖維細胞生長因子(FGFs)是由約150-200氨基酸組成的多肽，以兩種密切相關的形式存在，即堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)與酸性成纖維細胞生長因子?(aFGF)。FGFs作為細胞間信號分子，在胚胎發生和分化過程中起重要作用。其對很多種屬的骨細胞是一種潛在的絲裂原，能誘導包括成纖維細胞，成軟骨細胞、平滑肌細胞、成骨細胞、神經外胚層、骨骼肌細胞的復制。其中，FGF18是一個由207氨基酸組成的高度保守蛋白，與已發現的FGFs其他成員有30％-70％的同源性，最早由日本科學家從老鼠胚胎中分離得到。小鼠FGF18與人及大鼠的氨基酸序列具有99.5％和99％的同源性。在結構上，FGF18和FGF8、FGF17相似，為同一亞家族成員，具有70％-80％的氨基酸序列同源性。

FGF18存在于多種細胞類型中，其功能不僅僅局限于骨骼發育，可刺激眾多間質細胞和上皮細胞及組織的增殖，包括肺、腎臟、心臟、睪丸、脾臟、骨骼肌和大腦。有研究表明，FGF18是對多種細胞有效的分裂素，在肝臟和小腸發育過程中扮演著重要的角色。此外，FGF18在血管形成、形態發生、腫瘤生長和其他細胞組織發育過程中發揮著重要的作用，例如miR-21-5p靶向結合FGF18基因,?激活PI3K/Akt信號通路,從而促進人鼻咽癌組織及CNE1細胞的增殖；FGF18也是促進卵巢癌進展的一個重要因子。因此FGF18的定量檢測具有重要的臨床意義。而市場上現有的檢測試劑盒，體系中多采用多克隆抗體，抗體特異性差，不能區分FGF18高度同源家族蛋白，由于其抗體本身效價或特異性的原因，也使得其對?FGF18檢測的臨床效用受到局限，降低了樣本檢測的特異性，同時也對靈敏度產生一定的影響。因此急需獲得特異性識別FGF18蛋白單克隆抗體，滿足臨床樣本檢測要求，提高檢測的靈敏度和特異性。

本發明通過雙抗體夾心的原理，利用高親和力高特異性配對單克隆抗體制備檢測試劑盒，采用全自動化學發光儀檢測樣品濃度。

發明內容

現有的檢測體系中多采用多克隆抗體；抗體特異性差，不能區分FGF18高度同源家族蛋白，由于其抗體本身效價或特異性的原因，也使得其對FGF18檢測的臨床效用受到局限，降低了樣本檢測的特異性，同時也對靈敏度產生一定的影響。

為了解決上述存在的問題，本發其中一個目的為提供一種分泌抗FGF18單克隆抗體雜交瘤細胞株；本發明的目的之二在于提供分泌抗FGF18單克隆抗體雜交瘤細胞株分泌的單克隆抗體；本發明的目的之三在于提供含有所述單克隆抗體的試劑盒；本發明的目的之四在于提供所述單克隆抗體在制備檢測FGF18蛋白試劑中的應用。

本發明技術方案的其中一方面，提供了分泌抗FGF18單克隆抗體雜交瘤細胞株，雜交瘤細胞株為2C5D6和/或3E4F7，保藏于中國典型培養物保藏中心，(保藏中心地址為：中國.武漢.武漢大學，日期：2020-06-19，電話：[phone])，?2C5D6保藏編號為CGMCCNO.C202091,3E4F7保藏編號為CGMCC?NO.C202092。