[發(fā)明專利]一種定量檢測長雙歧桿菌菌株的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202011284336.7 | 申請日： | 2020-11-17 |
| 公開（公告）號： | CN112391484B | 公開（公告）日： | 2022-12-27 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 陳衛(wèi);肖越;翟齊嘯;于雷雷;田豐偉;陸文偉;崔樹茂;王剛;趙建新;張灝 | 申請（專利權(quán)）人： | 江南大學(xué) |
| 主分類號： | C12Q1/689 | 分類號： | C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/06;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 哈爾濱市陽光惠遠(yuǎn)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 214000 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 定量 檢測 長雙歧 桿菌 菌株 方法 | ||
1.一種鑒定長雙歧桿菌菌株的方法，其特征在于，使用核苷酸序列如SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.9所示的特異性引物對待鑒定菌株進(jìn)行PCR擴(kuò)增，若能擴(kuò)增出核苷酸序列如SEQID NO.3所示的基因片段，則待鑒定菌株為長雙歧桿菌，
所述長雙歧桿菌是長雙歧桿菌CCFM1114，分類學(xué)命名為Bifidobacterium longumsubsp.Longum，已于2019年12月30日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號為GDMCCNo.60941，保藏地址為廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓。
2.一種對樣本中長雙歧桿菌菌株進(jìn)行絕對定量的方法，其特征在于，所述方法為分離樣本中長雙歧桿菌菌株的單菌落；培養(yǎng)該長雙歧桿菌菌株，得到該長雙歧桿菌菌株的菌液；將該長雙歧桿菌菌株的菌液梯度稀釋后，使用核苷酸序列如SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.9所示的特異性引物，通過qPCR方法繪制以活菌數(shù)對數(shù)值為橫坐標(biāo)、以Cq值為縱坐標(biāo)的該長雙歧桿菌菌株的絕對定量標(biāo)準(zhǔn)曲線；使用核苷酸序列如SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.9所示的特異性引物，通過qPCR方法獲得樣本的Cq值，將獲得的Cq值代入該長雙歧桿菌菌株的絕對定量標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可獲得樣本中該長雙歧桿菌菌株的含量；
所述長雙歧桿菌是長雙歧桿菌CCFM1114，分類學(xué)命名為Bifidobacterium longumsubsp.Longum，已于2019年12月30日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號為GDMCCNo.60941，保藏地址為廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓。
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