[發(fā)明專利]一種肉瘤融合基因和/或突變聯(lián)合檢測引物組及試劑盒有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202011283582.0 | 申請日: | 2020-11-17 |
| 公開(公告)號: | CN112094915B | 公開(公告)日: | 2021-02-19 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 孫石磊;姬云 | 申請(專利權(quán))人: | 蘇州科貝生物技術(shù)有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/6886 | 分類號: | C12Q1/6886;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京精金石知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11470 | 代理人: | 尉月麗 |
| 地址: | 215123 江蘇省蘇*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 肉瘤 融合 基因 突變 聯(lián)合 檢測 引物 試劑盒 | ||
1.一種肉瘤融合基因和/或突變聯(lián)合檢測試劑盒,其特征在于,所述的肉瘤融合基因和/或突變聯(lián)合檢測試劑盒包括:
(1)一組用于檢測融合基因和點突變的特異性復(fù)合引物,所述特異性復(fù)合引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:10-SEQ ID NO:60所示;
(2)一種DNA文庫構(gòu)建的專用接頭,所述的DNA文庫構(gòu)建的專用接頭為接頭引物1分別和8條不同的i5端引物構(gòu)成的8個二聚體;
所述的接頭引物1的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;
所述的8條不同的i5端引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2-SEQ ID NO:9所示;
(3)一組文庫擴增復(fù)合引物,其特征在于,所述的文庫擴增復(fù)合引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:61-SEQ ID NO:69所示。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種肉瘤融合基因和/或突變聯(lián)合檢測試劑盒,其特征在于,所述的試劑盒還包括以下任意一個或多個試劑組:反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)試劑組;DNA片段化/末端修復(fù)/dA添加試劑組;DNA連接試劑組;PCR擴增試劑組;高保真熱啟動PCR擴增試劑組。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種肉瘤融合基因和/或突變聯(lián)合檢測試劑盒,其特征在于,
所述的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)試劑組包括隨機引物、第一鏈合成緩沖液、第一鏈合成酶混合液、第二鏈合成緩沖液、第二鏈合成酶混合液和超純水;
所述的DNA片段化/末端修復(fù)/dA添加試劑組包括10×DNA片段化緩沖液、5×片段化酶混合液和超純水;
所述的DNA連接試劑組包括5×連接酶緩沖液、TIANSeq DNA連接酶、專用接頭和超純水;
所述的PCR擴增試劑組包括5×多重PCR反應(yīng)酶混合液、PCR引物;
所述的高保真熱啟動PCR擴增試劑組包括高保真熱啟動酶反應(yīng)液、PCR引物和超純水。
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