[發明專利]CAR-T細胞培養基及其應用

在審

• 申請號: 202011282417.3
• 申請日: 2020-11-16
• 公開（公告）號: CN112375740A
• 公開（公告）日: 2021-02-19
• 發明（設計）人: 吳建勇;易小萍;滕小锘;張大鶴
• 申請（專利權）人: 蘇州米蘇生物技術有限公司
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10
• 代理公司: 南京利豐知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32256
• 代理人: 王鋒

本發明揭示了一種CAR?T細胞培養基及其應用。所述CAR?T細胞培養基包括：作為基礎組分的LONZA X?VIVO 15無血清免疫細胞培養基；以及，作為添加組分的蘿卜硫素、異丹葉大黃素及白藜蘆醇。優選的，所述CAR?T細胞培養基還可以包含水溶性甲殼素。較之現有技術，本發明所提供的CAR?T細胞培養基是無血清、不含異源動物成分的培養基，在應用于培養CAR?T細胞及其它各類免疫細胞時，可顯著提高這些細胞的成活率、殺傷活性和擴增倍數，具有廣闊的應用前景。

技術領域

本發明涉及一種細胞培養基，具體涉及一種CAR-T細胞培養基及其應用。

背景技術

CAR-T，即嵌合抗原受體修飾的T細胞，是通過體外基因編輯將CAR基因穩定整合至人T淋巴細胞基因組，聯合抗體作用和T淋巴細胞的效應功能，以非MHC限制性方式高特異性識別靶抗原從而殺傷腫瘤細胞。CAR-T療法在血液系統惡性腫瘤，如急性B淋巴母細胞病和B細胞型非霍奇金淋巴瘤治療中展現出驚人的治療效果。

為實現CAR-T細胞治療，首先需要進行CAR-T細胞的擴增。當前主要是采用含血清培養基和無血清培養基進行CAR-T細胞的培養，但這兩類培養基各有優劣之處。例如，含血清培養基可以使淋巴細胞等的增殖速度維持在一個較高水平，但其需要采用動物源成分有引起疾病的危險。而無血清培養基盡管安全性有所提升，然而其又會使增殖較為緩慢。

發明內容

本發明的主要目的在于提供一種CAR-T細胞培養基及其應用，以克服現有技術中存在的不足。

為實現前述目的，本發明采用的技術方案包括：

本發明實施例提供了一種CAR-T細胞培養基，其包括：作為基礎組分的LONZAX-VIVO15無血清免疫細胞培養基，以及，作為添加組分的蘿卜硫素、異丹葉大黃素及白藜蘆醇。

在一些實施方式中，所述CAR-T細胞培養基中蘿卜硫素的含量為1～10μmol/L。

優選的，所述CAR-T細胞培養基中蘿卜硫素的含量為2～5μmol/L。

在一些實施方式中，所述CAR-T細胞培養基中異丹葉大黃素的含量為80～150μmol/L。

優選的，所述CAR-T細胞培養基中異丹葉大黃素的含量為80～100μmol/L。

在一些實施方式中，所述CAR-T細胞培養基中白藜蘆醇的含量為1～15μmol/L。

優選的，所述CAR-T細胞培養基中白藜蘆醇的含量為5～8μmol/L。

在一些實施方式中，所述CAR-T細胞培養基還包含10～200μmol/L的水溶性甲殼素，所述水溶性甲殼素的重均分子量為200～1500。

優選的，所述CAR-T細胞培養基還包含20～50μmol/L的水溶性甲殼素。

本發明實施例還提供了一種CAR-T細胞培養基在體外培養CAR-T細胞中的用途。

與現有技術相比，本發明以上實施例所提供的CAR-T細胞培養基是無血清、不含異源動物成分的培養基，在應用于培養CAR-T細胞及其它各類免疫細胞時，可顯著提高這些細胞的成活率、殺傷活性和擴增倍數，具有廣闊的應用前景。

具體實施方式

通過閱讀以下具體實施方式將更完整地理解本發明。本文中揭示本發明的詳細實施例；然而，應理解，所揭示的實施例僅具本發明的示范性，本發明可以各種形式來體現。因此，本文中所揭示的特定功能細節不應解釋為具有限制性，而是僅解釋為權利要求書的基礎且解釋為用于教示所屬領域的技術人員在事實上任何適當詳細實施例中以不同方式采用本發明的代表性基礎。

若非特殊說明，本說明書中所涉及的技術術語的釋義與本領域的常規釋義相同，例如：