[發(fā)明專利]一種負(fù)載細(xì)胞調(diào)控因子的皮膚創(chuàng)面修復(fù)敷貼及其制備方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202011282364.5
• 申請日: 2020-11-16
• 公開（公告）號: CN112336908A
• 公開（公告）日: 2021-02-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 原波;何顯運(yùn);丘永亮
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東工貿(mào)職業(yè)技術(shù)學(xué)院
• 主分類號: A61L15/26
• 分類號: A61L15/26;A61L15/32;A61L15/18;A61L15/44;A61L15/28;A61L15/40;A61L15/46;A61L15/20;D04H1/4382;D04H1/728
• 代理公司: 廣州科沃園專利代理有限公司 44416
• 代理人: 陸豐艷

1.一種負(fù)載細(xì)胞調(diào)控因子的皮膚創(chuàng)面修復(fù)敷貼的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1.將配置好的靜電紡絲前驅(qū)液吸入固定在推進(jìn)泵上的注射器中進(jìn)行靜電紡絲工藝，真空干燥24h，去除未揮發(fā)完全的有機(jī)溶劑，制得高分子纖維薄膜；

S2.將明膠和光引發(fā)劑充分溶解于磷酸鹽緩沖溶液中，得到明膠預(yù)聚物溶液；

S3.提取細(xì)胞調(diào)控因子HB-EGF靶向基因片段，構(gòu)建目的基因質(zhì)粒，利用基因重組技術(shù)獲得質(zhì)粒DNA重組體，然后將質(zhì)粒DNA重組體添加到殼聚糖溶液和海藻糖溶液中，在轉(zhuǎn)速為50rpm的條件下，攪拌10min，制得質(zhì)粒DNA重組體溶液；

S4.在步驟S2制得的明膠預(yù)聚物溶液中加入生物活性玻璃粉體和S3得到的質(zhì)粒DNA重組體溶液，超聲分散30min，磁力攪拌4h，得到分散均勻的混合漿料；

S5.將步驟S4制得的混合漿料倒入底部鋪有步驟S1制得的高分子纖維薄膜的模具中，在365nm、5mW/cm2的紫外光照射20min，引發(fā)自由基聚合反應(yīng)，將反應(yīng)后的產(chǎn)物在磷酸鹽緩沖溶液中溶脹24h以去除未反應(yīng)的單體和光引發(fā)劑，即得。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的負(fù)載細(xì)胞調(diào)控因子的皮膚創(chuàng)面修復(fù)敷貼的制備方法，其特征在于，步驟S1中所述靜電紡絲前驅(qū)液的制備工藝為：將1g數(shù)均分子量為50000的聚己內(nèi)酯與15.5mL六氟異丙醇混合，得到質(zhì)量體積比濃度為0.08g/mL的溶液，將溶液在25℃下磁力攪拌12h，即得。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的負(fù)載細(xì)胞調(diào)控因子的皮膚創(chuàng)面修復(fù)敷貼的制備方法，其特征在于，步驟S1中所述靜電紡絲工藝為：推進(jìn)泵推進(jìn)速率1.5-2.0毫升/小時(shí)并保持紡絲液流量穩(wěn)定；紡絲噴頭為直徑為0.1-0.3毫米的平針頭，與高壓直流電源15-25千伏正極相連，紡絲噴頭跟收集極間的距離10厘米，紡絲環(huán)境相對濕度40-55％，溫度為25℃。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的負(fù)載細(xì)胞調(diào)控因子的皮膚創(chuàng)面修復(fù)敷貼的制備方法，其特征在于，步驟S2中所述光引發(fā)劑為2-羥基-2-甲基-1-苯基甲酮；所述磷酸鹽緩沖溶液的配置方法為：取磷酸二氫鉀100g，加水800ml，用磷酸調(diào)節(jié)pH至2.5，用水稀釋至1000ml，即得。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的負(fù)載細(xì)胞調(diào)控因子的皮膚創(chuàng)面修復(fù)敷貼的制備方法，其特征在于，步驟S2中所述明膠、光引發(fā)劑及磷酸鹽緩沖溶液的混合質(zhì)量比為9-13:2-5:19-24。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的負(fù)載細(xì)胞調(diào)控因子的皮膚創(chuàng)面修復(fù)敷貼的制備方法，其特征在于，步驟S3中所述質(zhì)粒DNA重組體與殼聚糖溶液的混合質(zhì)量比為1:7-9；所述質(zhì)粒DNA重組體與海藻糖溶液的混合質(zhì)量比為1:15-20。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的負(fù)載細(xì)胞調(diào)控因子的皮膚創(chuàng)面修復(fù)敷貼的制備方法，其特征在于，步驟S4中所述生物活性玻璃粉是CaO-P₂O₅-SiO₂三元系統(tǒng)，其中，SiO₂的質(zhì)量百分比為30-50％，P₂O₅的質(zhì)量百分比為20-70％，CaO的質(zhì)量百分比為15-20％。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的負(fù)載細(xì)胞調(diào)控因子的皮膚創(chuàng)面修復(fù)敷貼的制備方法，其特征在于，步驟S4中所述明膠預(yù)聚物溶液和生物活性玻璃粉體、DNA重組體溶液的的混合質(zhì)量比為5-9:6-11:13-17。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的負(fù)載細(xì)胞調(diào)控因子的皮膚創(chuàng)面修復(fù)敷貼的制備方法，其特征在于，步驟S5中高分子纖維薄膜表面的涂覆量為0.3-0.5g/cm²。

10.一種根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)所述的負(fù)載細(xì)胞調(diào)控因子的皮膚創(chuàng)面修復(fù)敷貼的制備方法制得的負(fù)載細(xì)胞調(diào)控因子的皮膚創(chuàng)面修復(fù)敷貼。