[發(fā)明專利]一種用于神經(jīng)再生的定向纖維蛋白與多肽互穿網(wǎng)絡(luò)復(fù)合水凝膠及其制備方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011280197.0
• 申請(qǐng)日: 2020-11-16
• 公開（公告）號(hào): CN112516385A
• 公開（公告）日: 2021-03-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王秀梅;曹崢;楊淑慧;楊嘉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 清華大學(xué)
• 主分類號(hào): A61L27/18
• 分類號(hào): A61L27/18;A61L27/22;A61L27/52;A61L27/54;A61L27/58
• 代理公司: 北京眾合誠(chéng)成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11246
• 代理人: 黃家俊

1.一種用于神經(jīng)再生的定向纖維蛋白與多肽互穿網(wǎng)絡(luò)復(fù)合水凝膠，其特征在于，所述復(fù)合水凝膠由纖維蛋白與多肽復(fù)合的定向纖維通過互穿原位交聯(lián)構(gòu)成；所述復(fù)合水凝膠具有多級(jí)取向性結(jié)構(gòu)，復(fù)合水凝膠直徑為0.5-5.0mm，復(fù)合水凝膠由微米纖維絲束構(gòu)成，微米纖維絲束直徑為10μm-100μm；微米纖維絲束由納米纖維絲束構(gòu)成，納米纖維絲束直徑為100nm-500nm。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述復(fù)合水凝膠，其特征在于，所述復(fù)合水凝膠中復(fù)合有一種或多種的多肽，所述多肽為自組裝多肽；進(jìn)一步的，所述自組裝多肽包括功能多肽；更進(jìn)一步的，所述功能多肽包括人工合成的層粘連蛋白、纖維粘連蛋白、鈣粘著蛋白、神經(jīng)生長(zhǎng)因子、腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子或血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的功能活性短肽接枝的自組裝多肽。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述復(fù)合水凝膠，其特征在于，多肽中功能多肽的含量為10wt％-100wt％。

4.一種根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述用于神經(jīng)再生的定向纖維蛋白與多肽互穿網(wǎng)絡(luò)復(fù)合水凝膠的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)CaCl₂水溶液與凝血酶溶液混合得到交聯(lián)溶液并在37℃保溫，所述交聯(lián)溶液中CaCl₂的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5％-3％，凝血酶的含量為4-50Units/mL，將所述交聯(lián)溶液置于旋轉(zhuǎn)接收盤中待用；

2)將電紡原液進(jìn)行靜電紡絲，電紡原液的添加速度為1.5-3mL/h，加載電壓為3-6kV；

3)使用旋轉(zhuǎn)接收盤接收靜電紡絲得到的纖維蛋白原紡絲，旋轉(zhuǎn)接收速度為50-100rpm，纖維蛋白原紡絲在交聯(lián)溶液的作用下得到復(fù)合產(chǎn)物；

4)將復(fù)合產(chǎn)物繼續(xù)強(qiáng)化交聯(lián)，得到所述復(fù)合水凝膠。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的復(fù)合水凝膠，其特征在于，所述步驟2)中電紡原液的配制方法為：纖維蛋白原溶液與多肽溶液混合均勻，再加入聚氧化乙烯水溶液混合均勻，得到電紡原液。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的復(fù)合水凝膠，其特征在于，所述步驟2)中電紡原液的配制方法為：將纖維蛋白原溶液與聚氧化乙烯水溶液混合均勻，得到電紡原液；在步驟3)之后，還包括以下步驟：將復(fù)合產(chǎn)物浸潤(rùn)于多肽溶液中，平衡后靜置20min。

7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的復(fù)合水凝膠，其特征在于，纖維蛋白原溶液的配制方法為：將纖維蛋白原溶解于純水中，得到纖維蛋白原溶液，其中纖維蛋白原的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2％-8％；

聚氧化乙烯水溶液的配制方法為：將聚氧化乙烯溶解于純水中，得到聚氧化乙烯水溶液，其中，聚氧化乙烯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1％-0.8％；

多肽溶液的配制方法為：將多肽粉末溶解于純水中，分散后得到多肽溶液；所述多肽溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5％-2％，置于4℃待用。

8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的復(fù)合水凝膠，其特征在于，所述步驟4)交聯(lián)反應(yīng)的條件為：37℃控溫交聯(lián)，磷酸鹽緩沖溶液交聯(lián)，10-30Units/mL谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶的磷酸鹽緩沖溶液交聯(lián)，濃度為10-60mmol/L的1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亞胺+濃度為3-30mmol/L的N-羥基琥珀酰亞胺+濃度為50mmol/L的磷酸二氫鉀溶液交聯(lián)其中一種或幾種聯(lián)用。

9.一種權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述定向纖維蛋白與多肽互穿網(wǎng)絡(luò)復(fù)合水凝膠在神經(jīng)損傷修復(fù)中的應(yīng)用。