[發明專利]一株聯產油脂與葡萄糖酸的產油酵母菌及其應用

在審

• 申請號: 202011279006.9
• 申請日: 2020-11-16
• 公開（公告）號: CN112760242A
• 公開（公告）日: 2021-05-07
• 發明（設計）人: 信豐學;章文明;錢秀娟;周大偉;董維亮;周杰;姜岷
• 申請（專利權）人: 南京工業大學
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;C12P7/58;C12P7/64;C12R1/645
• 代理公司: 江蘇致邦律師事務所 32230
• 代理人: 徐蓓;尹妍

1.一株聯產油脂與葡萄糖酸的產油酵母菌，其特征在于，分類命名為Cryptococcus podzolicus OY-1，保藏號為CCTCC M 2020732。

2.根據權利要求1所述的產油酵母菌在生產微生物油脂和葡萄糖酸中的應用。

3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，將所述產油酵母菌接種至YM固體培養基上培養進行菌種活化后，取單菌落接種至種子培養基進行兩代種子培養，種子液接種至發酵培養基發酵培養，獲取微生物油脂和葡萄糖酸產品。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述種子培養基與發酵培養基均為MM培養基，成分如下：葡萄糖50 g/L，KH₂PO₄ 8.99g/L，Na₂HPO₄·2H₂O 0. 12 g/L，sodiumcitrate·2H₂O 0.1 g/L，酵母粉 0.1 g/L，MgSO₄·7H₂O 0.2 g/L、(NH₄)₂SO₄ 4.72 g/L，另補充體積百分比2%的鹽溶液和2%的微量元素溶液；

鹽溶液組分為20 g/L MgSO₄·7 H₂O、10 g/L酵母粉；

微量元素溶液組分為4 g/L CaCl₂·2H₂O、0.55 g/L FeSO₄·7H₂O、0.475 g/L 檸檬酸、0.1 g/L ZnSO₄·7H₂O、0.076 g/L MnSO₄·H₂O、100 μL/L H₂SO₄ (96 %)。

5.根據權利要求3或4所述的應用，其特征在于，所述菌種活化的溫度為20℃，時間為2~3天。

6.根據權利要求3或4所述的應用，其特征在于，所述兩代種子培養的方式為：

1）一代種子培養：從YM固體培養基上取單菌落，接種于種子培養基恒溫培養；

2）二代種子培養：取一代種子培養的培養液按初始OD₆₀₀為0.5~1.0接種于新的種子培養基，和步驟1）同樣條件下恒溫培養，得到用于發酵培養的種子液。

7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于，所述恒溫培養的條件為20℃，200 rpm下培養24 h。

8.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，發酵培養的條件為20℃下發酵8-10天，600~1000 rpm、1vvm。

9.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，發酵培養時，從第二天起每天補充葡萄糖至濃度為90或150 g/L，同時按體積百分比補充2%的鹽溶液和2%的微量元素。

10.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，發酵液離心處理后獲得含葡萄糖酸的酵母發酵上清液，得到的酵母菌體經過液氮速凍，置于發酵罐中冷凍干燥至恒重后獲得微生物油脂產品。