[發明專利]一種檢測新型鴨呼腸孤病毒感染抗體的間接ELISA試劑盒

在審

• 申請號: 202011278310.1
• 申請日: 2020-11-16
• 公開（公告）號: CN112485424A
• 公開（公告）日: 2021-03-12
• 發明（設計）人: 潘群興;張小飛;盧鳳英;孫華偉;趙莎
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/543;C12N15/46;C12N15/70;C07K14/14
• 代理公司: 南京匯盛專利商標事務所(普通合伙) 32238
• 代理人: 袁靜

1.一種檢測新型鴨呼腸孤病毒感染抗體的間接ELISA試劑盒，其特征在于所述ELISA試劑盒包括包被有新型鴨呼腸孤病毒非結構蛋白p18的酶標板，所述新型鴨呼腸孤病毒非結構蛋白p18的序列如SEQ ID No：2所示。

2.如權利要求1所述檢測新型鴨呼腸孤病毒感染抗體的間接ELISA試劑盒，其特征在于，所述非結構蛋白p18采用包括如下步驟的方法制備：使所述新型鴨呼腸孤病毒非結構蛋白p18的編碼基因在生物中進行表達得到所述蛋白質；所述生物為微生物或植物。

3.根據權利要求2所述檢測新型鴨呼腸孤病毒感染抗體的間接ELISA試劑盒，其特征在于：使所述新型鴨呼腸孤病毒非結構蛋白p18的編碼基因在生物中進行表達包括將所述新型鴨呼腸孤病毒非結構蛋白p18的編碼基因導入受體微生物，得到表達所述重組新型鴨呼腸孤病毒非結構蛋白p18的微生物，培養所述重組微生物，表達得到所述新型鴨呼腸孤病毒非結構蛋白p18。

4.根據權利要求3所述試劑盒，其特征在于：所述非結構蛋白p18采用包括如下步驟的方法制備：將p18編碼基因插入pET-32a（+）中，然后導入大腸桿菌BL21(DE3)中，誘導表達重組菌后得到的所述蛋白質。

5.根據權利要求1-4中任一所述的試劑盒，其特征在于：所述新型鴨呼腸孤病毒非結構蛋白p18的編碼基因的序列如SEQ ID No：1所示。

6.根據權利要求5所述試劑盒，其特征在于：誘導表達條件是用1.0 mmol/L的IPTG在37℃誘導6 h。

7.根據權利要求1-6之一所述試劑盒，其特征在于所述試劑盒還包括洗滌液、稀釋液、HRP標記的羊抗鴨IgG（H+L）抗體、新型鴨呼腸孤病毒感染陽性對照血清和陰性對照血清、顯色液和終止液；所述HRP標記的羊抗鴨IgG（H+L）抗體購自美國KPL公司，編號為04-25-06。

8.根據權利要求7所述試劑盒，其特征在于所述酶標板采用含有BSA的PBS緩沖液封閉。