[發明專利]一種評估他克莫司藥物代謝的引物組、試劑盒及評估方法

有效

• 申請號: 202011278056.5
• 申請日: 2020-11-16
• 公開（公告）號: CN112322723B
• 公開（公告）日: 2023-06-13
• 發明（設計）人: 王子杰;鄭明;顧民;譚若蕓;居小兵;韓志堅;陶俊;魯佩;陳浩;孫黎;費爽;王增軍
• 申請（專利權）人: 江蘇省人民醫院（南京醫科大學第一附屬醫院）
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 江蘇瑞途律師事務所 32346
• 代理人: 金龍;劉琦

本發明屬于腎移植術后血清藥物濃度監測領域，公開了一種評估他克莫司藥物代謝的引物組、試劑盒及評估方法。具體指通過檢測與他克莫司代謝相關的兩個重要基因CYP3A5和POR上五個SNP位點(CYP3A5?rs15524、CYP3A5?rs4646453、POR?rs2286822、POR?rs1135612、POR?rs1057868)的基因型，預測他克莫司在患者體內的代謝情況，從而為個體化設計他克莫司初始服用劑量提供用藥指導。

技術領域

本發明屬于分子生物學領域，涉及腎移植術后血清藥物代謝狀態的監測。具體地，涉及一種評估他克莫司藥物代謝的引物組、試劑盒及評估方法。

背景技術

他克莫司是腎移植術后最為常用的免疫抑制劑之一，但其有效濃度范圍狹窄，并且在不同患者之間存在巨大藥物代謝動力學差異，復雜的藥物代謝會導致腎移植術后急慢性排異和移植腎毒性在內的一系列并發癥，因此他克莫司的臨床應用一直受到很大的限制。

目前，血清藥物濃度監測正廣泛應用于他克莫司使用中的個體化濃度監測，用以在維持足夠的治療量的他克莫司血清藥物濃度的同時最大程度地降低他克莫司的副反應。

現有的血清藥物濃度監測，一般采用色譜法，對血液樣本中與血漿蛋白結合或血漿中游離的藥物在全血中的濃度進行檢測。該檢測方法快速簡便，能夠有效檢測當前血樣中藥物濃度。但具有滯后性，只能在患者服用一定標準化的起始劑量后，檢測其血清藥物濃度，再依據檢測濃度，調整藥物使用量。然而，由于他克莫司相關的代謝酶在人體內的表達情況具有較大的個體差異，即使給予用公斤體重校正過的相同的起始他克莫司計量，仍有一部分腎移植術后患者可能會僅僅維持一個較低的血清藥物濃度，導致體內他克莫司達到穩定治療濃度的時間延遲，從而使患者承受更大的急性排異風險，或是血清藥物濃度過高，引起移植腎急性中毒反應。故目前急需一種可以在患者服藥前預測患者藥物代謝情況的方法，從而個體化設計他克莫司初始服用劑量，減少患者調整他克莫司用量以達到最佳治療濃度的時間，更好的治療患者。

CYP3A5和POR是他克莫司在體內代謝相關的兩個重要基因，相關位點的不同類型決定了他克莫司的代謝狀態。因此，測得相關位點的基因型，能夠判斷對他克莫司在患者體內的代謝狀態。單核苷酸多態性(Single?Nucleotide?Polymorphism，SNP)被稱為“第三代DNA遺傳標記”，具有分布密集、數量龐大、頻率高、屬二態性標記、存在相對穩定的特點，被認為是應用前景最好的遺傳標記物。因此，通過檢測他克莫司相關代謝基因的SNP位點，得到患者的基因型，可有效而穩定地在腎移植術前預測他克莫司在受者體內的代謝狀態。

發明內容

1.要解決的問題

患者腎移植術后血清中他克莫司藥物濃度調整到達穩態需要一定時間，因此有較高的排異或腎小管藥物中毒風險。而現有的血清藥物濃度檢測方法存在滯后性，且個體代謝差異大，因此，亟需一種可以在患者服藥前預測患者藥物代謝情況的檢測方法，從而個體化設計他克莫司初始服用劑量，減少患者調整他克莫司用量以達到最佳治療濃度的時間。

2.技術方案

為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案如下：

CYP3A5和POR是他克莫司代謝相關的兩個重要基因，如圖3-圖4所示，這2個基因上五個SNP位點(CYP3A5?rs15524、CYP3A5?rs4646453、POR?rs2286822、POR?rs1135612、PORrs1057868，SNP位點信息見表1)的突變，能夠揭示了他克莫司在患者體內的代謝情況。各位點可能的基因型如表2所示。

表1?SNP位點的基本信息

表2?SNP各位點可能的基因型