[發明專利]一種用于檢測實體腫瘤的抗體組合物、試劑盒及檢測方法

在審

• 申請號: 202011277902.1
• 申請日: 2020-11-16
• 公開（公告）號: CN112462065A
• 公開（公告）日: 2021-03-09
• 發明（設計）人: 倪萬茂;遲妍妍;陳慧;陳樂芝;陳鵬貴;林鵬程;林天鵬;朱陽承
• 申請（專利權）人: 浙江博真生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N33/68;G01N33/577
• 代理公司: 北京維正專利代理有限公司 11508
• 代理人: 鄭博文

本申請涉及腫瘤檢測技術領域，具體公開了一種用于檢測實體腫瘤的抗體組合物、試劑盒及檢測方法。抗體組合物包括抗CD45抗體、抗CD33抗體、抗CD71抗體、抗CD26抗體、抗CD326抗體和抗CD200抗體。試劑盒包括容器，容器內含有抗體組合物。檢測方法包括如下步驟：收集細胞；混合檢測：將細胞收集液和抗體組合物混合均勻，避光孵育后，加入溶血素混勻，再避光裂解，隨后進行離心，去除上清液，再加入PBS緩沖液，重懸；數據分析。本申請是針對游離狀態的腫瘤細胞的檢測技術，檢測血液中的循環腫瘤細胞或實體腫瘤脫落到周圍體液中的實體腫瘤細胞，并具有檢測快速、高效、可靠、取樣方便、適用范圍廣等優點。

技術領域

本申請涉及腫瘤檢測技術的領域，更具體的說，它涉及一種用于檢測實體腫瘤的抗體組合物、試劑盒及檢測方法。

背景技術

腫瘤是指機體在各種致瘤因子作用下局部組織細胞增生所形成的新生物。腫瘤在臨床上有實體腫瘤和非實體腫瘤之分，實體瘤是指可通過臨床檢查(如X線攝片、CT掃描、B超或觸診)捫及到的有形腫塊，非實體瘤是指通過臨床檢查無法看到或捫及到的腫瘤(如白血病)。

實體腫瘤又分為良性和惡性，其中惡性腫瘤具有生長迅速、邊界不清、易發生轉移等特點，而腫瘤轉移是致使大多數的腫瘤患者死亡的主要原因。

腫瘤轉移即惡性腫瘤細胞從原發灶脫落后經過循環系統達到其他部位并繼續生長的過程。雖然絕大多數的細胞會在循環系統中被迅速清除，但存活的部分細胞會在遠處組織或者器官滯留、附著，逃避宿主的免疫機制，然后增殖形成轉移灶。

目前實體腫瘤的常規診斷手段具有一定的局限性，如超聲、X光、CT等手段，需要在腫瘤達到一定體積后才能被檢測到，存在滯后性，容易導致患者錯過最佳的治療時機，且因輻射等原因不能作為實時檢測手段。

如組織活檢切片、免疫組化等手段，因需要穿刺活檢或術后才能獲得腫瘤組織，取材困難，不能作為實時監測手段。

而如AFP、CEA、CA125等腫瘤標志物檢測手段，只能間接反應腫瘤狀態，不能直接提供腫瘤進展信息，與病理相關性差，特異性不足。

發明內容

為了能夠實時監測實體腫瘤并實現高特異性，本申請提供一種用于檢測實體腫瘤的抗體組合物、試劑盒及檢測方法。

第一方面，本申請提供一種用于檢測實體腫瘤的抗體組合物，采用如下技術方案：

一種用于檢測實體腫瘤的抗體組合物，抗體組合物包括抗CD45抗體、抗CD33抗體、抗CD71抗體、抗CD26抗體、抗CD326抗體和抗CD200抗體，每種抗體均被標記有不同的熒光標記。

通過采用上述技術方案，抗CD45抗體、抗CD33抗體、抗CD71抗體用于排除白細胞、紅細胞和細胞碎片等；抗CD326抗體高表達表示該細胞為上皮源性癌細胞，而大多數實體腫瘤為上皮性腫瘤，如上皮性卵巢腫瘤占所有惡性卵巢腫瘤約90%、非小細胞肺癌（即上皮來源肺癌）占所有肺癌約80%、膀胱尿路上皮癌占所有膀胱癌中約90%；抗CD326抗體陰性且抗CD26抗體為陽性表示該細胞發生了上皮細胞-間充質轉化(EMT)；抗CD200抗體的差異表達可以鑒別一系列B細胞腫瘤。

優選上述六種抗體用于檢測，該抗體組合物具有高特異性，能夠實時監測實體腫瘤，且抗體的選用避免相互之間的干擾，檢測高效。

可選的，所述熒光標記選自PE/Cyanine7、PE、FITC、Alexa Fluor^?647、APC/Cyanine7和Brilliant Violet 421^TM。

通過采用上述技術方案，抗體不限定固定搭配某種熒光標記，選用該范圍的熒光標記，檢測效率高。

可選的，每種抗體均為單克隆抗體。