[發明專利]一種鑒別夏枯草蜂蜜的方法及其應用

在審

• 申請號: 202011277453.0
• 申請日: 2020-11-16
• 公開（公告）號: CN112461959A
• 公開（公告）日: 2021-03-09
• 發明（設計）人: 劉鵬
• 申請（專利權）人: 河南匯泉堂中藥飲片科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 張璐

本發明涉及一種鑒別夏枯草蜂蜜的方法及其應用，包括：通過液相色譜串聯質譜法對待測蜂蜜進行檢測，若負離子模式檢測到m/z307.0824、361.0697和425.1089的特征離子峰，則判定所述待測蜂蜜含有夏枯草蜂蜜。本發明通過夏枯草蜂蜜的固相萃取物進行質譜分析，篩選得到特征離子峰m/z307.0824、361.0697和425.1089，并通過進一步實驗驗證發現，只有夏枯草蜂蜜可以檢出這三個離子的特征峰，由此確定了通過液相色譜串聯質譜對m/z 307.0824、361.0697和425.1089特征離子進行檢測的識別夏枯草蜂蜜的方法，對于夏枯草蜂蜜品種鑒別具有重要意義。

技術領域

本發明涉及食品檢測領域，尤其涉及一種鑒別夏枯草蜂蜜的方法及其應用。

背景技術

蜂蜜是一種重要的蜂產品，不僅可作為傳統滋補食品和天然甜味劑，也有刺激傷口愈合、組織再生以及緩解胃腸道疾病、牙齦炎和其他疾病的作用。不同品種蜂蜜的成分、口感、顏色等取決于其蜜源的類型、地理位置、氣候以及采集蜂蜜的蜂種，同時也受加工工藝和貯藏條件的影響。現有技術中多是對特色蜂蜜中化學成分與營養功能進行評價研究，針對藥用植物蜂蜜研究還十分有限。

夏枯草為唇形科植物，是一種廣泛種植的中藥材，具有清火明目、軟堅散結之功效，其含有多種活性成分，如三萜類、甾體類、黃酮類、香豆素類等。已有研究表明夏枯草具有廣泛的藥理作用，如抗病毒、免疫抑制活性、抗氧化和清除自由基、抗腫瘤等，臨床使用也已有很長的歷史。夏枯草蜂蜜是蜜蜂采集夏枯草植物的花蜜并與自身分泌物混合后經充分釀造而成的天然甜物質，是一種特色蜂蜜。有研究報道了夏枯草蜂蜜的理化屬性，在動物實驗中發現夏枯草蜂蜜具有良好的抗結腸炎作用和對腸道菌群的調節作用，且多酚類物質在其中發揮主要作用。因此夏枯草蜂蜜具有很大的開發價值和商品價值，并為夏枯草蜂蜜的質量控制和真偽鑒別提供參考。

發明內容

為了至少解決一種現有技術存在的問題，本發明提供一種鑒別夏枯草蜂蜜的方法，通過夏枯草蜂蜜的特征離子可以實現對夏枯草蜂蜜進行準確、快速的鑒別。

第一方面，本發明提供一種鑒別夏枯草蜂蜜的方法，包括：

通過液相色譜串聯質譜法對待測蜂蜜進行檢測，若負離子模式同時檢測到m/z307.0824、m/z 361.0697和m/z 425.1089的特征離子峰，則判定所述待測蜂蜜含有夏枯草蜂蜜。

進一步地，所述特征離子峰偏差均小于5ppm。

進一步地，所述m/z 307.0824的保留時間為3.49±0.2min，所述m/z 361.0697的保留時間為5.29±0.2min，所述m/z 425.1089的保留時間為3.49±0.2min。

進一步地，在檢測前對所述待測蜂蜜進行預處理，所述預處理的步驟包括：

將所述待測蜂蜜溶于水混勻，后通過經甲醇活化的C18固相萃取小柱，用水淋洗所述C18固相萃取小柱后，用甲醇對所述C18固相萃取小柱進行洗脫，收集洗脫液，濃縮后復溶于甲醇。

進一步地，所述將所述待測蜂蜜溶于水混勻的過程中所述待測蜂蜜和所述水的比例為1：1.8～2.2。

進一步地，所述液相色譜串聯質譜法為通過液相色譜-四級桿-飛行時間質譜進行檢測。

優選地，所述預處理方法包括：

(1)將所述待測蜂蜜充分溶于純凈水中，形成蜂蜜溶液；

(2)將步驟(1)所得蜂蜜溶液通過活化后的固相萃取小柱，吸附蜂蜜中的有效成分；

(3)將步驟(2)得到的吸附有有效成分的洗脫柱，先用純水淋洗兩遍，然后用甲醇洗脫并收集洗脫液；

(4)將步驟(3)所得洗脫液進行濃縮，去除甲醇后得固形物，將所得固形物復溶于甲醇，即得進樣溶液。