[發(fā)明專利]一種β-煙酰胺單核苷酸的脫鹽方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011276956.6
• 申請日: 2020-11-16
• 公開（公告）號: CN114507263A
• 公開（公告）日: 2022-05-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 不公告發(fā)明人
• 申請（專利權(quán)）人: 尚科生物醫(yī)藥（上海）有限公司
• 主分類號: C07H1/06
• 分類號: C07H1/06;C07H19/048
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明公開了一種β?煙酰胺單核苷酸的脫鹽方法。該方法為將含無機(jī)鹽和β?煙酰胺單核苷酸的反應(yīng)液調(diào)節(jié)至特定的pH，流經(jīng)裝有特定的離子交換樹脂的分離柱，用水洗脫，再進(jìn)行納濾得到脫鹽的β?煙酰胺單核苷酸水溶液。本發(fā)明脫鹽得到的β?煙酰胺單核苷酸水溶液可直接經(jīng)過無菌過濾后凍干生產(chǎn)食品級β?煙酰胺單核苷酸凍干粉。

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種β-煙酰胺單核苷酸的脫鹽方法。

背景技術(shù)：

煙酰胺單核苷酸也叫β-煙酰胺單核苷酸(β-Nicotinamide Mononucleotide，β-NMN)，結(jié)構(gòu)如化合物Ⅰ所示。

β-煙酰胺單核苷酸在人體細(xì)胞能量生成中扮演重要角色，參與細(xì)胞內(nèi)NAD⁺(煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，細(xì)胞能量轉(zhuǎn)化的重要輔酶)的合成，是NAD⁺的關(guān)鍵前體之一。DavidScinclair研究團(tuán)隊在文獻(xiàn)Science,2017,355,1312-1317中報道，NAD⁺在小鼠體內(nèi)的增加，能夠使得大齡小鼠的組織和肌肉衰老跡象被延緩，這項研究工作使得人類向?qū)崿F(xiàn)長壽夢想邁進(jìn)了一大步。NAD⁺分子量過大，口服吸收利用率低。但隨著對NAD⁺前體小分子物質(zhì)β-煙酰胺單核苷酸的研究發(fā)現(xiàn)服用β-煙酰胺單核苷酸可以有效提升體內(nèi)NAD⁺的濃度并顯著改善人體新陳代謝，使得β-煙酰胺單核苷酸成為了“不老神藥”。這也促使全球醫(yī)藥、食品、化妝品界科研人員不斷的對β-煙酰胺單核苷酸進(jìn)行研究與開發(fā)。

關(guān)于β-煙酰胺單核苷酸的制備方法的報道很多，主要有化學(xué)合成、發(fā)酵和酶法制備三類。其中酶法制備因其成本低廉、生產(chǎn)安全、環(huán)境友好，更是大家關(guān)注的焦點。但是，β-煙酰胺單核苷酸生物轉(zhuǎn)化生產(chǎn)工藝中，采用大量的無機(jī)鹽，包括磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉以及氯化鎂等做為緩沖鹽或生物反應(yīng)微量元素，導(dǎo)致粗產(chǎn)品中二價和三價鹽含量高，難脫除。

如果采用常規(guī)的離子交換方法，由于產(chǎn)品中含有類似的磷酸基團(tuán)和陽離子結(jié)構(gòu)，產(chǎn)物得不到有效分離。

如果采用膜分離技術(shù)，由于產(chǎn)物分子量小，在可選擇的納濾膜范圍內(nèi)，二價和三價鹽透過率低，除鹽效果不好。

因此，我們需要開發(fā)一種簡單易操作的β-煙酰胺單核苷酸的脫鹽方法。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種操作簡單易于產(chǎn)業(yè)化的煙酰胺單核苷酸的脫鹽方法。

本發(fā)明提供一種β-煙酰胺單核苷酸的脫鹽方法，具體包括如下步驟：用鹽酸將含無機(jī)鹽和β-煙酰胺單核苷酸的反應(yīng)液pH值調(diào)節(jié)至2.5～3.0，然后流經(jīng)裝有強堿性陰離子交換樹脂的分離柱，用水洗脫，得到的流出液用氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)pH值至7.5～8.0，再流經(jīng)裝有強酸性陽離子交換樹脂的分離柱，用水洗脫，得到的流出液進(jìn)行納濾，得到脫鹽的β-煙酰胺單核苷酸水溶液。

進(jìn)一步，所述含無機(jī)鹽和β-煙酰胺單核苷酸的反應(yīng)液為來自生物法制備的反應(yīng)液，其中含無機(jī)鹽約100g/L，含β-煙酰胺單核苷酸30g/L。

進(jìn)一步，所述的鹽酸濃度為2～3mol/L。

更進(jìn)一步，所述強堿性陰離子交換樹脂選自201*4、201*7、201*7U、JK206、202、D202、D213、WDA-OH等，優(yōu)選強堿性陰離子交換樹脂D202。

進(jìn)一步，所述氫氧化鈉水溶液濃度為2～3mol/L。

更進(jìn)一步，所述強酸性陽離子交換樹脂選自001*1-16、D001、JK006、WDC-H等，優(yōu)選強酸性陽離子交換樹脂D001。

進(jìn)一步，所述得到脫鹽的β-煙酰胺單核苷酸水溶液中的鹽含量小于0.1g/L，含β-煙酰胺單核苷酸為80～100g/L。