[發明專利]貝萊斯芽孢桿菌BMF 03水懸浮劑及其制備方法與用途

有效

• 申請號: 202011273414.3
• 申請日: 2020-11-14
• 公開（公告）號: CN112493253B
• 公開（公告）日: 2021-06-04
• 發明（設計）人: 馬桂珍;暴增海;周麗穎;陳茹
• 申請（專利權）人: 江蘇海洋大學
• 主分類號: A01N63/22
• 分類號: A01N63/22;A01N25/04;A01P3/00
• 代理公司: 連云港潤知專利代理事務所 32255
• 代理人: 劉喜蓮

1.一種貝萊斯芽孢桿菌(Bacillus velezensis)BMF03水懸浮劑，其特征在于，該水懸浮劑由 貝萊斯芽孢桿菌BMF 03發酵液和助劑組成，所述的助劑種類及其占發酵液的體積百分比為：

濕潤分散劑木質素磺酸鈣1.5％；

粘度調節劑黃原膠0.25％；

消泡劑大豆油0.6％；

防腐劑氯化鈉0.8％；

紫外保護劑糊精0.2％；

發酵液的菌體密度不低于2×10⁹CFU/mL。

2.根據權利要求1所述的貝萊斯芽孢桿菌(Bacillus velezensis)BMF03水懸浮劑，其特征在于，所述的貝萊斯芽孢桿菌BMF 03發酵液的制備方法如下：

(1)將BMF 03菌株活化后，接種一環于盛有60mL PD培養基的250mL三角瓶中，28℃，180r/min振蕩培養16h；調整菌液濃度為10⁸個細胞/mL，作發酵用種子液；

(2)將BMF 03菌株種子液按照10％的接種量接種至裝有60mL PD培養基的250mL三角瓶中，28℃，180r/min搖床培養48h，芽孢率95％以上，即得到發酵液，調整發酵液菌體密度不低于2×10⁹CFU/mL。

3.一種如權利要求1所述的貝萊斯芽孢桿菌(Bacillus velezensis)BMF03水懸浮劑的制備方法，其特征在于，其步驟是：

(1)將BMF 03菌株活化后，接種一環于盛有60mL PD培養基的250mL三角瓶中，28℃，180r/min振蕩培養16h；調整菌液濃度為10⁸個細胞/mL，作發酵用種子液；

(2)將BMF 03菌株種子液按照10％的接種量接種至裝有60mL PD培養基的250mL三角瓶中，28℃，180r/min搖床培養48h，芽孢率95％以上，即得到發酵液，調整發酵液菌體密度不低于2×10⁹CFU/mL；

(3)按照權利要求1所述的助劑種類及體積比向發酵液中加入滅菌后的助劑，混勻，水懸浮劑的菌體密度不低于2×10⁹CFU/mL，檢測分裝。

4.根據權利要求3所述的貝萊斯芽孢桿菌(Bacillus velezensis)BMF03水懸浮劑的制備方法，其特征在于：水懸浮劑的菌落數不低于2×10⁹CFU/mL，懸浮率為90％以上，紫外照射90s后的存活率為80％以上；常溫和4℃貯存貯存期為105d，雜菌率在1％以下。

5.一種如權利要求1所述的貝萊斯芽孢桿菌(Bacillus velezensis)BMF03水懸浮劑的用途，其特征在于，所述的用途是貝萊斯芽孢桿菌(Bacillus velezensis)BMF03水懸浮劑作為有效成份用于制備治療梨輪紋病的藥物的用途。