[發明專利]一種二酮哌嗪生物堿類化合物及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202011272768.6
• 申請日: 2020-11-13
• 公開（公告）號: CN112341467B
• 公開（公告）日: 2022-09-27
• 發明（設計）人: 王斌貴;李洪雷;李曉明;楊遂群
• 申請（專利權）人: 中國科學院海洋研究所
• 主分類號: C07D487/04
• 分類號: C07D487/04;A61P9/12;A61P9/04;A61P3/10;C12P17/18;C12N1/14;C12R1/66
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 李穎

本發明涉及微生物醫藥技術領域，具體的說是一種從雜色曲霉(Aspergillus versicolor)發酵產物中獲得二酮哌嗪生物堿類化合物及其制備方法和應用。二酮哌嗪生物堿類化合物為式I所示，分子式為C₂₂H₂₃N₃O₃的化合物1和化合物2；經實驗表明本發明所述化合物對血管緊張素轉化酶具有顯著抑制活性，有望開發成為治療高血壓、心力衰竭、糖尿病合并高血壓等疾病的藥物或藥物先導化合物。

技術領域

本發明涉及微生物醫藥技術領域，具體的說是一種從雜色曲霉(Aspergillusversicolor)發酵產物中獲得二酮哌嗪生物堿類化合物及其制備方法和應用。

背景技術

高血壓是常見的心血管疾病，全球約1/3的成年人患有高血壓，而我國成年人高血壓患病率約為23.2％，患病人數達2.45億。腎素-血管緊張素-醛固酮系統(RAS)是人體心血管升壓系統，在高血壓疾病形成和發展中具有關鍵作用；血管緊張素轉化酶(ACE)催化血管緊張素Ⅰ(Ang Ⅰ)轉化為血管緊張素Ⅱ(Ang Ⅱ)，Ang Ⅱ促使血管強烈收縮，血管壓力增加。因此，ACE是治療高血壓、心力衰竭以及糖尿病合并高血壓等疾病的重要靶點，因此，發現新的、具有發展成為ACE抑制劑類藥物的小分子實體化合物具有重要意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一種從雜色曲霉(Aspergillus versicolor)發酵產物中獲得二酮哌嗪生物堿類化合物及其分離純化方法和在血管緊張素轉化酶抑制劑類藥物方面的應用。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案為：

一種二酮哌嗪生物堿類化合物，二酮哌嗪生物堿類化合物為式I所示，分子式為C₂₂H₂₃N₃O₃的化合物1和化合物2；

式I。

一種二酮哌嗪生物堿類化合物的制備方法：

1)將雜色曲霉(Aspergillus versicolor)接種于液體培養基(按重量百分比計，蔗糖2％，甘露醇2％，酵母提取物0.3％，蛋白胨0.5％，K₂HPO₄ 0.05％,MgSO₄·7H₂O0.03％,余量純海水配制，pH 6.5-7.0)中發酵培養，發酵液經乙酸乙酯浸泡、提取和濃縮，獲得發酵液粗提物和菌絲體；

菌絲體用丙酮-水80:20(v/v)超聲破碎提取，提取液減壓濃縮除去丙酮后，再經乙酸乙酯萃取、濃縮，獲得菌絲體粗提物。

2)將步驟1)中發酵液粗提物和菌絲體粗提物合并，進行減壓硅膠柱層析，采用的洗脫液依次是梯度為20:1至1:1(v/v,下同)的石油醚-乙酸乙酯和梯度為20:1至5:1的二氯甲烷-甲醇；收集石油醚-乙酸乙酯2:1洗脫得到的組分，進行RP-18反相硅膠柱層析，以梯度為10:90至90:10的甲醇-水洗脫；

3)收集步驟2)中甲醇-水50:50洗脫得到的組分，先以梯度為150:1至100:1的二氯甲烷-甲醇作為洗脫液進行硅膠柱層析純化，再用甲醇凝膠柱層析純化，即得到式I所示目標化合物1；

4)收集步驟2)中甲醇-水70:30洗脫得到的組分，先以梯度為20:1至10:1的石油醚-丙酮作為洗脫液進行硅膠柱層析純化，再用甲醇凝膠柱層析和高效液相色譜(HPLC)純化，以甲醇-水65:35作為流動相，收集225nm波長下23.0min的吸收峰，即得式Ⅱ所示目標化合物2。

所述真菌培養條件為溫度25℃，自然光照，培養時間30天。

一種二酮哌嗪生物堿類化合物的應用，所述式I所示的化合物用于制備治療高血壓、心力衰竭、糖尿病合并高血壓疾病藥物。