[發明專利]一種宮頸癌診斷、預后判斷試劑盒

有效

• 申請號: 202011272210.8
• 申請日: 2020-11-13
• 公開（公告）號: CN112375825B
• 公開（公告）日: 2022-07-05
• 發明（設計）人: 焦薪霖;張青;崔保霞;孔北華
• 申請（專利權）人: 山東大學齊魯醫院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 李箏

本發明具體涉及一種宮頸癌診斷、預后判斷試劑盒。宮頸癌目前仍是女性健康的一大威脅，現階段，宮頸癌篩查方式是宮頸液基細胞學檢查聯合HPV病毒檢測，但細胞學檢測結果受人為主觀影響較大，檢測結果準確性不足。因此，提供更為準確的宮頸癌早期診斷技術具有重要的意義。基于上述現狀，本發明通過篩查工作確認了MSC甲基化程度與宮頸癌發展狀況呈正相關，基于該發現，本發明提供了一種用于宮頸癌早期篩查、診斷及預后情況判斷的試劑盒，通過QMSP方式進行檢測，顯著提高了檢測的靈敏度及特異性。

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，具體涉及一種用于宮頸癌早期篩查、診斷及預后情況判斷的試劑盒。

背景技術

公開該背景技術部分的信息僅僅旨在增加對本發明的總體背景的理解，而不必然被視為承認或以任何形式暗示該信息構成已經成為本領域一般技術人員所公知的現有技術。

宮頸癌是女性第四大常見癌癥，也是癌癥導致女性死亡的第四大病因。根據國際癌癥研究機構(International Agency for Research on Cancer)發布的最新全球數據，2018年全球共有569847例宮頸癌新發病例，311365人死于宮頸癌。雖然HPV疫苗接種和早期宮頸癌篩查已成為預防該病的有效策略，但在中低收入國家中依然存在著該病較高的發病率和死亡率。盡管中國宮頸癌患者的生存率有了明顯的提高，但相比于其他發達國家仍存在著一定的差距。

高危型人乳頭瘤病毒HPV的持續感染，被認為是宮頸癌發生發展的主要原因。目前，臨床上應用的宮頸癌篩查的主要方法是宮頸液基細胞學檢查聯合HPV病毒檢測，但細胞學檢測受到人為影響較大，漏診幾率較高，HPV檢測特異性較低，存在過度治療的局限性。近年來，隨著對表觀遺傳學的研究，尤其是DNA甲基化檢測技術的成熟，作為癌癥發生的早期階段，DNA甲基化檢測逐步成為宮頸癌前病變檢測的新興診斷方法。大量甲基化基因如SOX1、PAX1、JAM3、EPB41L3、CADM1、MAL等也被認為是宮頸癌篩查的生物標志物。為了進一步提高宮頸癌的篩查效能，探索和開發更靈敏有效、更穩定便捷、更易應用于臨床的分子標記物具有重要意義。

發明內容

針對上述研究進展和現有技術，發明人經過檢索和查閱大量文獻以及利用全基因組甲基化芯片對850k個甲基化位點進行篩選，并結合焦磷酸鹽測序，最終篩選出一批在宮頸鱗癌中特異性高甲基化的基因。通過檢測、驗證和分析，本發明首次發現MSC基因隨宮頸病變程度的加重，其DNA的甲基化程度逐漸升高，并且與宮頸癌分期密切相關，可以作為宮頸癌早期篩查的分子標記物。

基于上述研究成果，本發明提供以下技術方案：

本發明首先提供MSC基因作為宮頸癌診斷、預后和/或治療標志物的應用。

所述MSC基因其核苷酸序列如下：

GCGGATTCTGGACTTGGGCGCCAACTCGTAGTCCACGCTCCCCGGGGTCAGCAGAGGGGCGCTCACGCTCTCGCCACCCACCTCGCTTTCTCACCCCGCGCTTCCCGGCCTGGGTTTTTAGTCTTCCTTGGAGCGCTCTCTGGCCTCCGCCTCCGCCAGGGAGCGGAAGGCGGAGACAGCGAGACTGGCCAGGGGGGAGGAAAGAGGACGCGTGTGGGCAAGGGGGACAACGGG(SEQ ID NO:1)。

依據本發明的研究結果，這些序列多位于CpG島，基因組中絕大多數CpG島位于啟動子區、外顯子區和第一內含子區。在腫瘤的發生過程中，啟動子CpG島胞嘧啶的異常高甲基化和整體基因的低甲基化導致整個基因的不穩定性和基因表達譜的改變，包括抑癌基因的失活、轉錄因子無法與DNA結合抑制轉錄等。依據本發明研究結論，MSC基因的甲基化程度與腫瘤發展情況呈正相關，特別是在宮頸癌中，MSC基因的甲基化率在宮頸癌不同發展時期具有顯著的差異。