[發明專利]用于核酸檢測的逆轉錄酶突變體在審
| 申請號： | 202011271788.1 | 申請日： | 2020-11-13 |
| 公開（公告）號： | CN114480338A | 公開（公告）日： | 2022-05-13 |
| 發明（設計）人： | 蔣析文;劉靄珊;鄭桑桑;連獻蘭 | 申請（專利權）人： | 廣州達安基因股份有限公司 |
| 主分類號： | C12N9/12 | 分類號： | C12N9/12;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12Q1/70;C12Q1/6851;C12R1/19;C12R1/93 |
| 代理公司： | 上海助之鑫知識產權代理有限公司 31328 | 代理人： | 陳詳 |
| 地址： | 510665 廣東省*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 核酸 檢測 逆轉錄 突變體 | ||
1.一種M-MLV酶突變體，其特征在于，所述M-MLV酶突變體在第583位氨基酸殘基、和第446位氨基酸殘基發生突變，并且，第583位的氨基酸殘基位點突變為Asn，第446位的氨基酸殘基位點突變為Cys，其中氨基酸殘基編號對應于SEQ ID NO.1所示的編號。
2.如權利要求1所述的M-MLV酶突變體，其特征在于，所述M-MLV酶突變體的氨基選序列與SEQ ID NO.1相比具有至少約80％的同源性；更優選地，具有至少約90％的同源性；最優選地，具有至少約95％的同源性；如具有至少約96％、97％、98％、99％的同源性。
3.一種多核苷酸分子，其特征在于，所述多核苷酸分子編碼權利要求1所述的M-MLV酶突變體。
4.一種載體，其特征在于，所述載體含有權利要求3所述的多核酸分子。
5.一種宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞含有權利要求4所述的載體或染色體整合有權利要求3所述的多核酸分子。
6.如權利要求5所述的宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞為原核細胞、或真核細胞。
7.一種試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含權利要求1所述的M-MLV酶突變體。
8.一種制備權利要求1所述的M-MLV酶突變體的方法，包括步驟：
(i)在適合的條件下，培養權利要求5所述的宿主細胞，從而表達出所述的M-MLV酶突變體；和
(ii)分離所述的M-MLV酶突變體。
9.權利要求1所述的M-MLV酶突變體在制備逆轉錄檢測試劑或逆轉錄試劑盒中的用途。
10.一種RNA逆轉錄方法，其特征在于，所述方法包括步驟：
(1)提供含有RNA的樣品；
(2)逆轉錄反應：
使用權利要求1所述的逆轉錄酶突變體對步驟(1)提供的含有RNA的樣品進行逆轉錄反應。
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