[發明專利]含有逆轉錄酶突變體的核酸檢測試劑盒

有效

• 申請號: 202011271784.3
• 申請日: 2020-11-13
• 公開（公告）號: CN114480336B
• 公開（公告）日: 2023-10-20
• 發明（設計）人: 劉靄珊;蔣析文;趙繼光;張偉
• 申請（專利權）人: 廣州達安基因股份有限公司
• 主分類號: C12N9/12
• 分類號: C12N9/12;C12N15/54;C12Q1/48
• 代理公司: 上海助之鑫知識產權代理有限公司 31328
• 代理人: 陳詳

1.一種M-MLV酶突變體，其特征在于，所述M-MLV酶突變體在第313位氨基酸殘基、和第446位氨基酸殘基發生突變，并且，第313位的氨基酸殘基位點突變為Gln，第446位的氨基酸殘基位點突變為Cys，其中氨基酸殘基編號對應于SEQ ID NO.1所示的編號。

2.如權利要求1所述的M-MLV酶突變體，其特征在于，所述M-MLV酶突變體的氨基選序列與SEQ ID NO.1相比具有至少約80％的同源性；更優選地，具有至少約90％的同源性；最優選地，具有至少約95％的同源性；如具有至少約96％、97％、98％、99％的同源性。

3.一種多核苷酸分子，其特征在于，所述多核苷酸分子編碼權利要求1所述的M-MLV酶突變體。

4.一種載體，其特征在于，所述載體含有權利要求3所述的多核酸分子。

5.一種宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞含有權利要求4所述的載體或染色體整合有權利要求3所述的多核酸分子。

6.如權利要求5所述的宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞為原核細胞、或真核細胞。

7.一種試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含權利要求1所述的M-MLV酶突變體。

8.一種制備權利要求1所述的M-MLV酶突變體的方法，包括步驟：

(i)在適合的條件下，培養權利要求5所述的宿主細胞，從而表達出所述的M-MLV酶突變體；和

(ii)分離所述的M-MLV酶突變體。

9.權利要求1所述的M-MLV酶突變體在制備逆轉錄檢測試劑或逆轉錄試劑盒中的用途。

10.一種RNA逆轉錄方法，其特征在于，所述方法包括步驟：

(1)提供含有RNA的樣品；

(2)逆轉錄反應：

使用權利要求1所述的逆轉錄酶突變體對步驟(1)提供的含有RNA的樣品進行逆轉錄反應。