[發明專利]一種響應面法優化平枝栒子總黃酮的提取工藝

有效

• 申請號: 202011271713.3
• 申請日: 2020-11-13
• 公開（公告）號: CN112168873B
• 公開（公告）日: 2021-11-30
• 發明（設計）人: 洪開文;宋倫;鄭重;陳懿;劉晶;許鋒;彭靜婧;胡文銳;鮑琳清
• 申請（專利權）人: 安順職業技術學院
• 主分類號: A61K36/73
• 分類號: A61K36/73;A61P39/06;G01N1/28;G01N21/31
• 代理公司: 遵義浩嘉知識產權代理事務所(普通合伙) 52112
• 代理人: 石文義

本發明涉及一種響應面法優化平枝栒子總黃酮的提取工藝，所述提取工藝包括有制備對照品溶液、制備樣品溶液、測定檢測波長、制作標準曲線、回歸模型的建立與分析、實驗結果分析與優化。采用本發明所述的提取工藝，具有提取工藝簡單，提取效率較高，易于推廣應用，應用響應面法優化確定最優因素，保證提取科學性、穩定性，為質量標準研究提供依據，其實用性強，并通過抗氧化活性測試，為平枝栒子的綜合開發利用提供了理論基礎和實驗依據。

技術領域

本發明屬于植物提取技術領域，具體地說是涉及一種響應面法優化平枝栒子總黃酮的提取工藝。

背景技術

平枝栒子( Cotoneaster horizontalis Decne.) 屬于薔薇目( Rosales) 薔薇科( Rosaceae) 平枝栒子屬( Co- toneaster) 。 平枝栒子分布于我國陜西、甘肅、湖北、湖南、四川、貴州、云南等地區，《中華本草》記載藥材名為“水蓮沙”，具有清熱利濕，化痰止咳，止血止痛等功效，其葉、果實和果皮含右旋兒茶精(catechin)、左旋表兒茶精(epicatechin)等成分。

平枝栒子枝葉橫展，葉小而稠密，花密集枝頭，晚秋時葉色紅色，紅果累累，是布置巖石園、庭院、綠地和墻沿、角隅的優良材料。另外，還可作地被和制作盆景，果枝也可用于插花。根可藥用。以枝葉或根入藥。中藥名為水蓮沙。全年均可采，洗凈，切片，曬干。葉、果實和果皮含右旋兒茶精(catechin)，矢車菊素(cyanidin)，花色素(anthocyanidin)等成分。性味酸、澀，涼。清熱利濕，化痰止咳，止血止痛。主治痢疾，泄瀉，腹痛，咳嗽，吐血，痛經，白帶。

黃酮是基于2-苯基色原酮-4-酮（2-苯基-1-苯并吡喃-4-酮）骨架的黃酮類化合物。黃酮類化合物是廣泛存在于植物界的一大類天然產物，具有抗炎、抗病毒、強心、鎮靜、鎮痛、抗氧化、抗衰老和抗腫瘤等作用，其藥用有效成分已經逐漸為人們所認識。目前，響應面曲線法優化平枝栒子中總黃酮提取工藝及其體外抗氧化性研究未見文獻報道，為充分開發和利用平枝栒子，急需一種響應面法優化平枝栒子總黃酮的提取工藝。

發明內容

本發明為了解決現有技術中存在的問題，從而提供一種操作簡單、易于工業化生產的提取工藝，以平枝栒子為原料，運用超聲提取法在單因素實驗的基礎上，從乙醇濃度、液料比、提取時間、提取溫度等因素對平枝栒子中總黃酮含量的影響，并通過多元二次回歸方程來擬合響應面值與因素之間函數關系的一種優化平枝栒子中總黃酮的提取工藝，并對其體外抗氧化活性進行研究，并為平枝栒子的綜合開發利用提供理論基礎和實驗依據，具體地說是一種響應面法優化平枝栒子總黃酮的提取工藝。

為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案是：一種響應面法優化平枝栒子總黃酮的提取工藝，所述提取工藝包括有制備對照品溶液、制備樣品溶液、測定檢測波長、制作標準曲線、回歸模型的建立與分析、實驗結果分析與優化，具體包括以下步驟：

(1)制備對照品溶液：稱取120℃干燥至恒重的蘆丁對照品51.90mg，置于燒杯中，加入乙醇溶液，于水浴鍋上50～55℃溶解，定容至100mL容量瓶中，搖勻，得到0. 5190mg/mL的蘆丁對照溶液；

(2)制備樣品溶液：將平枝栒子粉碎，過20～40目篩，稱取粗粉1.0g，置于具有瓶塞的錐形瓶中，加入乙醇溶液超聲提取，冷卻至室溫，過濾，加乙醇溶液補足失去的重量，即得平枝栒子總黃酮提取液；

(3)測定檢測波長：精密吸取平枝栒子總黃酮提取液5.0mL置于25mL容量瓶中，加入濃度為5%的NaNO₂溶液1.0mL，搖勻，放置10min，加入濃度為10%的Al(NO_３)_３溶液1.0mL，搖勻，放置10min，加入濃度為4%的NaOH溶液10.0mL，再用乙醇溶液稀釋至刻度，靜置15min，在200～800nm波長處每隔2nm測定一次吸光度；樣品溶液在502nm處有最大吸收，即為測定波長；