[發(fā)明專利]一種基于拉曼光譜法測(cè)定維生素D3含量的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011267572.8
• 申請(qǐng)日: 2020-11-13
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112268889A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-01-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 羅功才;曾佳艷;黃生權(quán);王雅琪;張力凡
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 紐斯葆廣賽（廣東）生物科技股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N21/65
• 分類號(hào): G01N21/65
• 代理公司: 東莞市華南專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 44215
• 代理人: 劉克寬

本發(fā)明屬于功效成分分析技術(shù)領(lǐng)域，提供一種基于拉曼光譜法測(cè)定維生素D3含量的方法，該方法的步驟為：先配制不同維生素D3濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，對(duì)上述標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行拉曼光譜掃描，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液的維生素D3濃度及上述拉曼光譜圖的峰面積(即拉曼光譜強(qiáng)度)，制得線性回歸方程；再直接對(duì)含維生素D3的樣品進(jìn)行拉曼光譜掃描，根據(jù)上述線性回歸方程和樣品的拉曼光譜圖的峰面積，確定上述樣品中維生素D3的含量。該方法無(wú)需對(duì)樣品進(jìn)行繁瑣的前處理，操作非常簡(jiǎn)單、易于掌握，省時(shí)省力，能快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)維生素D3原料及含有維生素D3的制劑產(chǎn)品中的維生素D3含量；該方法僅需一臺(tái)拉曼光譜儀即可完成檢測(cè)，大大降低了檢測(cè)成本，利于普及和推廣。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及功效成分分析技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種基于拉曼光譜法測(cè)定維生素D3含量的方法。

背景技術(shù)

維生素D3能提高肌體對(duì)鈣、磷的吸收。以維生素D3制成的營(yíng)養(yǎng)品等產(chǎn)品，適用于治療缺乏維生素D引起的兒童佝僂病，也適用于治療成人缺鈣導(dǎo)致的其他疾病，如骨質(zhì)疏松。

目前，現(xiàn)有檢測(cè)維生素D3以及含維生素D3產(chǎn)品的方法，大多為高效液相色譜法或液質(zhì)聯(lián)用法。該檢測(cè)方法主要依據(jù)GB5009.82-2016第四法，采用正相-反相雙系統(tǒng)檢測(cè)，因此，需要兩臺(tái)高效液相色譜儀。該檢測(cè)方法具有如下缺陷：1)需要對(duì)樣品進(jìn)行縮分、粉碎、皂化、提取、洗滌、濃縮、凈化、洗脫、氮吹定容等前處理，步驟繁瑣，操作時(shí)間長(zhǎng)；2)在用正相-液相儀對(duì)樣品進(jìn)行凈化的過(guò)程中，難以準(zhǔn)確掌握維生素D3在管路的流出時(shí)間，容易造成維生素D3的損失，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確度差；3)該檢測(cè)方法對(duì)實(shí)驗(yàn)室要求很高，需兩臺(tái)高效液相色譜儀、兩根色譜柱，儀器的投入成本和維護(hù)成本非常高，導(dǎo)致檢測(cè)成本居高不下，不利于普及。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種基于拉曼光譜法測(cè)定維生素D3含量的方法，該方法能快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)維生素D3原料以及含有維生素D3的制劑產(chǎn)品中的維生素D3含量，且檢測(cè)成本更低。

基于此，本發(fā)明公開(kāi)了一種基于拉曼光譜法測(cè)定維生素D3含量的方法，包括如下步驟：

步驟一，配制不同維生素D3濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液；

步驟二，采用拉曼光譜儀對(duì)不同維生素D3濃度的所述標(biāo)準(zhǔn)溶液分別進(jìn)行掃描，以獲得所述標(biāo)準(zhǔn)溶液的拉曼光譜圖，再確定所述標(biāo)準(zhǔn)溶液的拉曼光譜圖的峰面積(也即拉曼光譜強(qiáng)度)；

步驟三，根據(jù)所述標(biāo)準(zhǔn)溶液的維生素D3濃度及其拉曼光譜圖的峰面積，獲得線性回歸方程；

步驟四，稱取定量的含維生素D3的樣品，采用拉曼光譜儀對(duì)所述樣品進(jìn)行掃描，以獲得所述樣品的拉曼光譜圖，再確定所述樣品的拉曼光譜圖的峰面積；

步驟五，根據(jù)所述線性回歸方程和所述樣品的拉曼光譜圖的峰面積，確定所述樣品中維生素D3的含量。

優(yōu)選地，步驟一中，所述標(biāo)準(zhǔn)溶液中維生素D3的濃度分別為0.3％、0.5％、1％、2％、3％。

進(jìn)一步優(yōu)選地，步驟一中，所述標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制方法為：分別稱取不同重量的維生素D3標(biāo)準(zhǔn)品，分別加甲醇溶解，以制成維生素D3濃度分別為0.3％、0.5％、1％、2％、3％的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

優(yōu)選地，步驟三中，所述線性回歸方程以所述標(biāo)準(zhǔn)溶液的維生素D3濃度為縱坐標(biāo)，以其拉曼光譜圖的峰面積為橫坐標(biāo)。

進(jìn)一步優(yōu)選地，步驟三中，所述線性回歸方程為：y＝0.018x-0.013。

優(yōu)選地，步驟四中，當(dāng)含維生素D3的所述樣品為粉末時(shí)，所述粉末的取樣重量為20～30mg。

優(yōu)選地，步驟四中，當(dāng)含維生素D3的所述樣品為軟膠囊時(shí)，所述軟膠囊的內(nèi)容物的取樣重量為240mg～260mg。