[發明專利]一種砧木用櫻桃苗的快速繁育方法

有效

• 申請號: 202011264122.3
• 申請日: 2020-11-12
• 公開（公告）號: CN112189566B
• 公開（公告）日: 2022-10-04
• 發明（設計）人: 楊俊霞;楊映紅;李幗英;馬建芳;吳和平;康曉育;王花
• 申請（專利權）人: 天水市果樹研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G2/10
• 代理公司: 蘭州嘉諾知識產權代理事務所(普通合伙) 62202
• 代理人: 郭海

1.一種砧木用櫻桃苗的快速繁育方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）初代培養，剪取材料：5-6月份吉塞拉12號新芽萌發后，在連續晴天的第2-3天的早晨，選取大田或溫室栽培砧木的1-2年生、健壯的頂芽和下面的第一側芽的帶芽莖段裝入干凈培養瓶中，分別標記放入組培室，將帶芽莖段在體積濃度為2‰的84消毒液中浸泡5-10min后在流水下沖洗2-6min，然后放入洗潔精稀釋液中清洗10-15min，然后放入脫脂紗布在流水中沖洗1-2 h，在超凈工作臺上用體積濃度為75%的酒精中浸泡10-25ms后用無菌水沖洗2-3次，然后在體積濃度為0.1%的升汞溶液中處理2-5min，處理完成后移到無菌水中沖洗4-6次，然后切0.4-0.5cm帶芽莖段，用無菌濾紙吸干水分，轉接到裝有初代培養培養基的培養瓶中，每瓶接2個帶芽莖段，移入培養室，培養溫度為21-24℃，濕度為65-75％，分別給予暗培養7-10天、光照2000-2400LX15-20天進行培養；

（2）擴繁系代：將初代培養成活的無菌系瓶苗進行擴繁，選取生長健壯、整體度一致的芽轉接到擴繁培養基中，每瓶接4個芽，移入培養室，培養溫度為21-24℃，濕度為65％-75％，先后分別給予暗培養7-10天、光照2000-2400LX20-35天培養；

（3）無菌系材料人工恒溫箱脫毒：初代培養無菌系材料萌發長到0.5-0.8cm時，剪取新芽0.4-0.6cm進行擴繁系代轉接，轉接到擴繁培養基，每瓶接4株，具體為：先在22-25℃條件下培養15-20天，然后轉移到人工氣候箱中后分別給予每天光照培養16h、暗培養8h，前11-13天人工氣候箱暗培養從25℃開始，每天溫度升高1度，升溫至32℃后不再升溫，保持32℃不變；光照培養從25℃開始，每天溫度升高1度，升溫至36-38℃后溫度保持不變，后20天人工氣候箱光照培養在36-38℃進行，暗培養在32℃的溫度下進行，然后從獲得材料嫩梢上剝取0.4-0.5mm莖尖進行轉接培養 12-16天，然后進行第二次剝莖尖，剝取0.4-0.5mm莖尖培養35-45天時，剪取1.5-3.5cm的芽，病毒檢測，獲得脫毒試管苗按照步驟（2）的方法做擴繁系代；

（4）扦插生根：

1）將擴繁35-45天的脫毒試管苗擴繁材料，用鑷子從培養瓶中取出，切去基部愈傷組織，剪取長1.5-2.5cm的單株莖段，摘去基部2-4片小葉，裝入容器中噴水封口備用；

2）準備營養缽，放入基質，加入生根營養液；

3）把剪好的試管苗按2×2cm間距插入營養缽內基質中，插滿后用白色塑料薄膜覆蓋整盤營養缽，使小苗置于營養缽內較封閉的空間中，進行生根培養；

4）培養15-20天后，觀察生根情況，當小苗基部生出叢狀根時，揭去塑料膜，將營養缽移至地面遮蔭培養，濕度保持在85％以上管理；

5）培養40-60天后，營養缽中的小苗葉片變綠變厚，根系加速生長時，將小苗單株移入蛭石和腐熟有機肥中，其中蛭石與腐熟有機肥的質量比為1：0.3，按時澆透水，使苗木逐漸適應露地生長環境，等小苗長到5-10cm時，帶土移入大田，參照大田育苗方法管理。

2.根據權利要求1所述的一種砧木用櫻桃苗的快速繁育方法，其特征在于：所述步驟（1）中培養基為MS培養基+6-BA 0.2-0.5mg/L+NAA 0.02-0.06mg/L+VC 50-100mg/L+活性炭10g/L+白砂糖30g/L+瓊脂5g/L，pH為5.6。

3.根據權利要求2所述的一種砧木用櫻桃苗的快速繁育方法，其特征在于：所述步驟（1）中培養瓶為100-150ML，每瓶灌裝25-30mL培養基，將分裝了培養基的培養瓶放置高壓鍋中在0.137-0.140MPa大氣壓下滅菌20-25分鐘，取出放置2-3天后接帶芽莖段。

4.根據權利要求3所述的一種砧木用櫻桃苗的快速繁育方法，其特征在于：所述步驟（2）中擴繁培養基為MS培養基+白砂糖30g/L+瓊脂5g/L+6-BA 0.60mg/L+IBA 0.05-0.10mg/L+GA 0.05-0.15mg/L，pH為5.6。