[發(fā)明專利]一種羊肚菌母種的高純度提煉加工工藝

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011260103.3
• 申請(qǐng)日: 2020-11-12
• 公開（公告）號(hào): CN112430545A
• 公開（公告）日: 2021-03-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 謝勇;劉小敏;黎成楊
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 正安綠?？缔r(nóng)業(yè)有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): C12N1/02
• 分類號(hào): C12N1/02;C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 北京聯(lián)創(chuàng)佳為專利事務(wù)所(普通合伙) 11362
• 代理人: 石誠;韓煒

1.一種羊肚菌母種的高純度提煉加工工藝，其特征在于，具體包括以下步驟：

步驟S1、母種培養(yǎng)基制作：取500克黃豆芽放入鍋中，然后添加1L水煮35分鐘，蒸煮完成后將鍋中的物品取出進(jìn)行過濾取汁，將得到的汁液重新放入鍋中，然后添加水至1L，向鍋內(nèi)加入白糖20克、瓊脂20克和羊肚菌基腳40克后進(jìn)行蒸煮，蒸煮至國內(nèi)的物品完全融化，將溶化后的培養(yǎng)基分裝于18毫米乘180毫米的試管中，盛裝至試管的1/5處，在試管口塞上棉花，將試管放入高壓滅菌鍋中進(jìn)行滅菌；

步驟S2、菌種分離：取羊肚菌基腳放入無菌容器中，然后向無菌容器中添加無菌水進(jìn)行稀釋，將無菌容器靜置，使無菌容器中的溶液靜置，當(dāng)無菌容器中的容易澄清時(shí)，使用接種針蘸取少量的澄清溶液，將蘸取的澄清溶液滴到步驟一制作的培養(yǎng)基上，塞上棉花后取出進(jìn)行培養(yǎng)分離，分離后，將培養(yǎng)基放到恒溫箱中進(jìn)行恒溫培養(yǎng)觀察，3天后培養(yǎng)基上萌發(fā)菌絲，每天仔細(xì)觀察記錄每支試管中培養(yǎng)基的發(fā)菌及變化情況，羊肚菌菌絲最初為灰白色，時(shí)間長會(huì)變?yōu)樽攸S色，羊肚菌母種需要7天長滿試管，待羊肚菌母種長滿試管，取少量的羊肚菌菌絲進(jìn)行試種培養(yǎng)，出菇后判斷是否為羊肚菌母種；

步驟S3、轉(zhuǎn)接提純、將培養(yǎng)基放置在陰干房中陰干，去除培養(yǎng)基中的水分，在接種箱內(nèi)藥物滅菌后，取黃豆大一塊的帶有菌絲的培養(yǎng)基放入空白的培養(yǎng)基中，每支母種試管可以10-15支空白培養(yǎng)基試管，接種后放置在培養(yǎng)箱中進(jìn)行避光培養(yǎng)，2-3天會(huì)萌發(fā)菌絲，7天可以長滿斜面培養(yǎng)基，從而能夠得到高純度的羊肚菌母種。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種羊肚菌母種的高純度提煉加工工藝，其特征在于：步驟S1中將滅菌后的培養(yǎng)基放置在高壓滅菌鍋中，使培養(yǎng)基在0.68千克的壓力下維持60分鐘，自然冷卻至高壓滅菌鍋的指針回到原位才可打開。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種羊肚菌母種的高純度提煉加工工藝，其特征在于：步驟S2中的恒溫培養(yǎng)觀察的溫度為12-18℃，在恒溫培養(yǎng)觀察期間需要每兩個(gè)小時(shí)記錄菌絲的生長情況，記錄羊肚菌菌絲生長是否存在異常，及時(shí)的作出對(duì)應(yīng)的調(diào)整。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種羊肚菌母種的高純度提煉加工工藝，其特征在于：步驟S3中得到的高純度羊肚菌母種保存時(shí)，需要放入冰箱在0-3℃溫度下保存，保存時(shí)間最長不超過半年。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種羊肚菌母種的高純度提煉加工工藝，其特征在于：步驟S2中得到的羊肚菌菌絲用接種針挑取一些放到事先準(zhǔn)備好的蓋玻片上，并加少量無菌水滴在羊肚菌菌絲上，并用載玻片壓實(shí)羊肚菌菌絲后拿到顯微鏡下，確認(rèn)是羊肚菌的菌絲體，整個(gè)過程要在超凈工作臺(tái)其它工作模式開啟下進(jìn)行。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種羊肚菌母種的高純度提煉加工工藝，其特征在于：所述步驟S1中母種培養(yǎng)基的厚度為1.5mm-4mm。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種羊肚菌母種的高純度提煉加工工藝，其特征在于：所述步驟S3在接種提純的過程中需要進(jìn)行無菌操作，避免羊肚菌母種被污染。