[發(fā)明專利]一種納米人參皂苷CK的制備方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202011257343.8 | 申請(qǐng)日： | 2020-11-12 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN112336642A | 公開(kāi)（公告）日： | 2021-02-09 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 宋嘉川 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 廣東啟山生物科技有限公司 |
| 主分類號(hào)： | A61K8/63 | 分類號(hào)： | A61K8/63;A61K8/02;A61K8/86;A61K8/9789;A61Q19/02;A61Q19/08 |
| 代理公司： | 合肥方舟知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 34158 | 代理人： | 劉躍 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 納米 人參 皂苷 ck 制備 方法 | ||
本發(fā)明公開(kāi)了一種納米人參皂苷CK的制備方法，涉及化妝品技術(shù)領(lǐng)域，采用薄膜水化法制備各聚合物膠束：分別稱取PEG?PLA2k/2k、PEG?PLA5k/5k100mg，人參皂苷CK0?8mg，加1?50mL甲醇溶解，于25?60℃減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，形成均一透明薄膜，加入1?20mL去離子水振蕩，經(jīng)0.22μm微孔濾膜濾過(guò)，得不同載藥量的載人參皂苷CK的PEG?PLA納米膠束，凍干備用；本發(fā)明制備了納米人參皂苷CK，提高了其水溶性，有望增強(qiáng)其藥效發(fā)揮，并研究了其美白作用，可望作為納米人參化妝品用于美白、抗皺、祛斑等化妝品領(lǐng)域。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及化妝品技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種納米人參皂苷CK的制備方法。
背景技術(shù)
人參具有得天獨(dú)厚的滋補(bǔ)美容效果，其作為中國(guó)傳統(tǒng)的美容護(hù)膚佳品，被公認(rèn)為具有美白、抗皺、延緩衰老的功效，從20世紀(jì)80年代開(kāi)始人參被廣泛應(yīng)用于化妝品中，如人參潤(rùn)膚霜、人參美白霜、人參面膜等多種人參化妝品，成為目前使用最為廣泛的植物化妝品原料之一。
美白作用通常通過(guò)抑制黑色素的生成來(lái)實(shí)現(xiàn)，皮膚美白劑通常是以酪氨酸酶為作用靶點(diǎn)，通過(guò)抑制酪氨酸酶活性或者阻斷酪氨酸生成黑色素的氧化途徑，從而減少黑色素的生成，達(dá)到美白皮膚的效果。
人參皂苷CK是二醇型人參皂苷在人腸道內(nèi)的代謝產(chǎn)物，是人參在體內(nèi)發(fā)揮活性的成分之一，生物活性研究表明人參皂苷CK是一個(gè)多靶點(diǎn)、高活性化合物，其不但在抗腫瘤、抗炎、保肝和抗過(guò)敏方面表現(xiàn)出較好的活性，而且在神經(jīng)系統(tǒng)及免疫系統(tǒng)方面也具有很好的調(diào)節(jié)作用。
然而，人參皂苷CK溶解度較低，口服吸收較差，限制了其功效作用。
發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種納米人參皂苷CK的制備方法，解決了背景技術(shù)中提到的問(wèn)題。
為實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：一種納米人參皂苷CK的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)稱取PEG-PLA2k/2k 100mg、PEG-PLA5k/5k 100mg、人參皂苷CK 1-10mg；
(2)加1-50mL甲醇溶解，于25-60℃減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，形成均一的透明薄膜；
加入1-20mL去離子水振蕩，經(jīng)0.22μm微孔濾膜濾過(guò)，得不同載藥量的載人參皂苷CK的PEG-PLA納米膠束。
納米人參皂苷CK膠束粒徑的測(cè)定：取各膠束溶液置比色皿中，分別在室溫及37℃條件下觀察，采用激光粒度分析儀測(cè)定，結(jié)果表明PEG-PLA2k/2k-2mg和PEG-PLA5k/5k-4mg的載藥膠束的穩(wěn)定性優(yōu)于其他膠束，在三天內(nèi)粒徑穩(wěn)定均勻，其他膠束在第三天析出晶體，穩(wěn)定性較差；
采用α-脫氧核糖氧化法測(cè)定羥基自由基水平：取200μLFeSO4-EDTA混合液(10mM)于帶塞試管中，加入等體積的α-脫氧核糖溶液(10mM)，然后加入200μL樣品溶液(游離CK，四種納米CK濃度0,10,50,100,250,500,1000μg/mL)，然后用0.1M磷酸鹽緩沖液(pH7.4)定容至1.8mL，最后加入0.2mLH2O2(10mM)，混勻，在37℃孵育4h，然后，加入1mL2.8％三氯乙酸(TCA)和1mL1.0％硫代巴比妥酸(TBA)，混勻后于沸水浴加熱10min，冰水冷卻，采用紫外-可見(jiàn)光譜儀分析532nm處吸光度，用同體積水替代樣品，作為對(duì)照組，羥基自由基捕獲能力(％)＝(Asample-Ablank)/Asample×100；
CK褪黑作用：細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞活性分析，培養(yǎng)人黑素細(xì)胞，培養(yǎng)板中分別加入0,10,50,100,250,500,1000μg/mL游離CK及4種納米CK，37℃培養(yǎng)48h，檢測(cè)MTT活性；
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