[發(fā)明專利]一種丹參組培快繁的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011254112.1
• 申請(qǐng)日: 2020-11-11
• 公開（公告）號(hào): CN112167064A
• 公開（公告）日: 2021-01-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 宋振巧;王建華;任振麗;田國(guó)慶
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東農(nóng)業(yè)大學(xué);山東丹紅制藥有限公司
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00;A01G31/00
• 代理公司: 北京輕創(chuàng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11212
• 代理人: 劉紅陽

1.一種丹參組培快繁的方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、選取供品系試驗(yàn)的溫室大棚和試驗(yàn)地；

S2、對(duì)接種外植體進(jìn)行選取；

S3、配制激素類母液備用；

S4、配制培養(yǎng)基備用；

S5、對(duì)培養(yǎng)基、接種室和超凈工作臺(tái)進(jìn)行滅菌處理；

S6、對(duì)外植體進(jìn)行滅菌處理；

S7、對(duì)已滅菌的外植體進(jìn)行切割和接種；

S8、對(duì)接種后的外植體進(jìn)行培養(yǎng)；

S9、將不定芽從愈傷中分離開，轉(zhuǎn)接到相同培養(yǎng)基繼續(xù)繼代培養(yǎng)，并進(jìn)行生根培養(yǎng)；

S10、選取品種純正、健康、葉色濃綠、組織結(jié)實(shí)無玻璃化現(xiàn)象、無徒長(zhǎng)現(xiàn)象、根系白且粗壯、有多條、無變異的培育苗；

S11、對(duì)選取的培育苗進(jìn)行訓(xùn)苗。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種丹參組培快繁的方法，其特征在于，根據(jù)S2中的操作步驟，取材前對(duì)植株的葉片大小形狀、葉色、株型進(jìn)行鑒定，確保該植株保持原有品種特性，選擇丹參生長(zhǎng)旺盛的溫暖季節(jié)，晴朗天氣，進(jìn)行取材，選擇生長(zhǎng)健壯的植株，靠近莖尖部位的幼嫩葉片，取回后盡量3天內(nèi)接種完。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種丹參組培快繁的方法，其特征在于，根據(jù)S3中的操作步驟，包括以下步驟：

S301、用電子分析天平準(zhǔn)確稱取激素類藥品NAA和6－BA各0.1g，NAA先用少量0.1mol∕LNaOH或95%酒精溶解；

S302、6－BA用0.1mol∕L的HCL溶解；

S303、將已溶解的激素類藥品NAA和6－BA溶液分別加蒸餾水定容至100ml，即成濃縮至1mg∕ml的激素類母液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種丹參組培快繁的方法，其特征在于，根據(jù)S4中的操作步驟，所述培養(yǎng)基的配制包括以下步驟：

S401、按4.74 g/L比例，稱取適量MS培養(yǎng)基粉末溶解于適量蒸餾水，按0.7%瓊脂和3%蔗糖加入后加熱至瓊脂完全溶解，蒸餾水定容至所需體積，按培養(yǎng)基激素配比加入相應(yīng)激素量，后用1mol/L NaOH溶液和1mol/L HCl溶液調(diào)節(jié)pH值，趁熱分裝至培養(yǎng)瓶中，養(yǎng)基體積占培養(yǎng)瓶的1/5-1/4，制得MS培養(yǎng)基；

S402、按2.47g/L比例 稱取適量1/2 MS培養(yǎng)基粉末溶解于適量蒸餾水，按0.7%瓊脂和3%蔗糖加入后加熱至瓊脂完全溶解，蒸餾水定容至所需體積，按培養(yǎng)基激素配比加入相應(yīng)激素和容量，后用1mol/L NaOH溶液和1mol/L HCl溶液調(diào)節(jié)pH值，趁熱分裝至培養(yǎng)瓶中，培養(yǎng)基體積占培養(yǎng)瓶的1/5-1/4，制得1/2MS培養(yǎng)基。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種丹參組培快繁的方法，其特征在于，根據(jù)S5中的操作步驟，包括以下步驟：

S501、培養(yǎng)基滅菌：將分裝好的培養(yǎng)基，準(zhǔn)備充足的蒸餾水和濾紙，一起放入高壓滅菌鍋內(nèi)，進(jìn)行高溫高濕高壓滅菌，121℃高壓滅菌20分鐘，備用；

S502、接種室滅菌：在接種前4h用甲醛與高錳酸鉀混合薰蒸接種室，并打開紫外燈照射30min；

S503、超凈工作臺(tái)滅菌：正式接種前半小時(shí)左右，打開超凈工作臺(tái)上的紫外燈和風(fēng)機(jī)，20-30min后接種。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種丹參組培快繁的方法，其特征在于，根據(jù)S6中的操作步驟，從溫室取回的葉片材料，經(jīng)自來水沖洗干凈，用肥皂、洗衣粉或吐溫洗滌，用無菌水洗2-3次，放入工作臺(tái)，倒入70%-75%的酒精中浸泡約30s，再在0．1％的升汞中浸泡5-10min，或在10％的漂白粉上溶液中浸泡10-15min，浸泡時(shí)可進(jìn)行攪動(dòng)，使植物材料與滅菌劑有良好的接觸，然后用無菌水沖洗3-5次。