[發明專利]一種牡蠣散指紋圖譜的建立方法及其指紋圖譜

有效

• 申請號: 202011252906.4
• 申請日: 2020-11-11
• 公開（公告）號: CN112394117B
• 公開（公告）日: 2022-08-05
• 發明（設計）人: 馬曉青;魏寶紅;胡淑曼;劉紅兵;管華詩
• 申請（專利權）人: 青島海洋科學與技術國家實驗室發展中心;青島海洋生物醫藥研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 青島海昊知識產權事務所有限公司 37201
• 代理人: 王鐸

本發明公開了一種牡蠣散指紋圖譜的建立方法及其指紋圖譜。所述指紋圖譜的建立方法包括以下步驟：步驟1：參照峰溶液的制備；步驟2：牡蠣散供試品溶液的制備；步驟3：分別精密吸取定量參照峰溶液和供試品溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖；步驟4：將步驟3中獲得的牡蠣散指紋圖譜儀器導出，并導入中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統，選擇不同批次牡蠣散供試品色譜圖中均存在的色譜峰作為共有峰，用平均值計算法生成牡蠣散的對照指紋圖譜，計算各共有峰的相對保留時間、相對峰面積。本發明建立指紋圖譜的方法具有簡便、穩定、精密度高、重現性好等優點。本發明所提供的牡蠣散指紋圖譜，能全面，客觀地表征牡蠣散的質量，有利于全面監控藥物的質量。

技術領域

本發明涉及一種牡蠣散指紋圖譜的建立方法，以及利用上述方法建立的牡蠣散指紋圖譜，屬于中藥質量鑒定技術領域。

背景技術

中藥指紋圖譜是運用現代分析技術鑒別中藥材或中成藥的真偽，評價原料藥、半成品和成品質量的一致性和穩定性的一種綜合分析的有效手段。與現有的單一有效成分或指標性成分的鑒定相比，中藥指紋圖譜技術綜合各種有效化學信息，使結果更為科學、合理。目前，中藥指紋圖譜已成為國內外公認的中藥質量控制的重要方法，指紋圖譜的研究和建立，對于提高中藥復方質量、促進中藥現代化具有重要意義。

牡蠣散始載于《太平惠民和劑局方》，為歷代固澀劑中固表止汗劑的代表方劑之一。全方由煅牡蠣、黃芪、麻黃根和浮小麥四味藥組成，其功效主治為：治諸虛不足，及新病暴虛，津液不固，體常自汗，夜臥即甚，久而不止，羸瘠枯瘦，心忪驚惕，短氣煩倦。其臨床表現自汗盜汗，夜臥更甚，心悸驚惕，短氣煩倦，舌淡紅，脈細弱等，該方臨床應用較多，如加減治療原發性手汗癥、腦外傷手術汗證、放療中汗癥等，療效顯著，有望開發成具有海洋特色的止汗新藥。

然而，牡蠣散成分復雜，一、兩個成分的定性定量分析難以全面反映復方的全面信息，且至今無牡蠣散指紋圖譜的相關研究。

發明內容

針對上述問題，本發明的第一個目的是提供一種精密度高、重復性和穩定性好的牡蠣散指紋圖譜的建立方法，用于牡蠣散的質量控制。

本發明的另外一個目的是提供利用上述方法建立的牡蠣散指紋圖譜。

本發明采用的具體技術方案為：

一種牡蠣散指紋圖譜的建立方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟1：取毛蕊異黃酮苷、刺芒柄花苷、毛蕊異黃酮對照品，加甲醇溶解，制備參照峰溶液；

步驟2：取不同批次的牡蠣散供試品，置于容器中，加水溶解，采用C18 固相萃取柱進行預處理，制備牡蠣散供試品溶液；

步驟3：分別精密吸取參照峰溶液和供試品溶液，注入液相色譜儀，采集色譜圖；

步驟4：將步驟3中獲得的牡蠣散供試品溶液的指紋圖譜的積分信號導入《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統》軟件；選擇不同批次牡蠣散的色譜圖中均存在的色譜峰作為共有峰，用平均值計算法生成牡蠣散的對照指紋圖譜，并計算各共有峰的相對保留時間、相對峰面積；

作為優選方案，以上所述的牡蠣散指紋圖譜的建立方法，步驟2中采用C18 固相萃取柱進行預處理的流程為：甲醇活化，水平衡，上樣，不同濃度的甲醇水溶液淋洗，甲酸甲醇洗脫，收集洗脫液，N₂吹干，殘渣加甲醇復溶，離心，取上清液，即得。

作為優選方案，以上所述的牡蠣散指紋圖譜的建立方法，步驟3中，分別精密吸取參照峰溶液和供試品溶液各5μL，注入液相色譜儀，采集95分鐘內的色譜圖。