[發明專利]一種熒光染色液及其應用

在審

• 申請號: 202011241676.1
• 申請日: 2020-11-09
• 公開（公告）號: CN112461630A
• 公開（公告）日: 2021-03-09
• 發明（設計）人: 馬力敏;楊海芳;趙起卿
• 申請（專利權）人: 深圳市梓健生物科技有限公司
• 主分類號: G01N1/30
• 分類號: G01N1/30;G01N1/28
• 代理公司: 北京維正專利代理有限公司 11508
• 代理人: 任志龍

本申請涉及熒光染色技術領域，具體公開了一種熒光染色液及其應用。其中，熒光染色液由以下原料制成：熒光劑、緩沖溶液、防腐劑、水。本申請的熒光染色液可用于對人體分泌物或體液的上皮細胞、白細胞、細菌、真菌、寄生蟲進行染色，其具有提高微生物檢出率，降低漏診率和誤診率的優點。

技術領域

本申請涉及熒光染色技術領域，更具體地說，它涉及一種熒光染色液及其應用。

背景技術

病原微生物是一類可以侵犯人體，引起感染甚至傳染病的微生物，也稱病原體。病原體的家族非常龐大，包括細菌、真菌、寄生蟲、病毒等等。

不同的病原微生物侵犯并感染人體后容易引起不同的疾病，比如致瀉性大腸桿菌容易擾亂人體腸道平衡，引起腹瀉；沙門氏菌侵入人體上皮細胞后，會使人體出現惡心、嘔吐的癥狀，引起腸炎；溶血性鏈球菌在人體呼吸道大量的繁殖會造成人體咽痛、發熱而罹患扁桃體炎；假絲酵母菌和滴蟲是人體陰道易感致病菌，容易寄生于人體陰道內，導致陰道菌群失調，從而引起陰道炎；隱孢子蟲可寄生在人體呼吸道、肺臟等多個器官，使人體出現腹痛、腹脹的癥狀，造成人體腹瀉。可見，病原微生的存在會對人體身體健康造成一定影響，存在安全隱患，因此檢測病原微生物、及時發現病原微生物很重要。

傳統的病原微生物檢測方法包括直接涂片法，其通過將微生物固定在載玻片上，然后將載玻片放置在顯微鏡下進行觀察，來檢測微生物。

針對上述中的相關技術，發明人認為傳統的直接涂片法的放大倍數相對較低，而霉菌芽生孢子等的體積很小，容易誤認，并且當玻片不潔時，微生物更加難以辨認，于是導致微生物檢測時容易漏診或誤診。

發明內容

為了提高微生物的檢出率，本申請提供一種熒光染色液及其應用。

第一方面，本申請提供一種熒光染色液，采用如下的技術方案：

一種熒光染色液，所述熒光染色液由以下原料制成：熒光劑、緩沖溶液、防腐劑、水。

通過采用上述技術方案，本申請的熒光染色液通過熒光基團結合細胞和微生物的DNA和RNA，使染色劑對細胞和微生物進行特殊染色，然后利用熒光顯微鏡，使細胞和微生物在特定波長的激發光下顯示出顏色，從而達到觀察微生物、檢測微生物的目的。相比傳統的直接涂片法，本申請的熒光染色液通過熒光將微生物與背景區分開，使微生物清晰可見，更加容易辨認，方便觀察與評價，具有提高檢出率，降低漏診率和誤診率的效果。此外，本申請的熒光染色液的使用步驟簡潔，耗時短，操作便捷，微生物的檢測過程更加簡化。

優選的，所述熒光染色液由以下原料制成：

熒光劑 1.8-2.7g/L

緩沖溶液 9-11g/L

防腐劑 0.2-0.5 mL/L；

還包括水。

通過采用上述技術方案，經測試，當熒光劑、緩沖溶液、防腐劑的用量控制在上述范圍內時，背景更弱，熒光強度更好，染色更清晰，并且無非特異性著色，鏡下細胞和微生物更加明顯，因此微生物的觀察更加方便。

優選的，所述熒光染色液由以下原料制成：

熒光劑 2.1-2.4g/L

緩沖溶液 9.7-10.5g/L

防腐劑 0.2-0.4mL/L；

還包括水。

優選的，所述熒光劑包括SYBR Green I、碘化丙啶、吖啶黃、光神霉素、派若寧Y、奎納克林芥子、赫斯特、沉香磷化氫、硫代黃素T和櫻草素中的一種或多種的組合物。

通過采用上述技術方案，上述熒光劑均為常見的核酸熒光染料，與DNA、RNA有強的親和性，能夠嵌入核酸分子內，從而對核酸分子進行標記，實現對DNA、RNA的特殊染色。同時，上述核酸熒光染料染色效果好，獲取容易，使用方便，均適用于對細胞和微生物進行染色。