[發明專利]一種可提高北冬蟲夏草發酵液中蟲草素產量的方法

在審

• 申請號: 202011240825.2
• 申請日: 2020-11-09
• 公開（公告）號: CN112391428A
• 公開（公告）日: 2021-02-23
• 發明（設計）人: 張軍;徐婷;孫薈;李少華;李良超;杜航;杜研;鞠蒙蒙;李傅霞;王聰;白雪;于洪元;李鵬飛;李博;金海晴;張婷;周彥航
• 申請（專利權）人: 長春圣金諾生物制藥有限公司
• 主分類號: C12P19/40
• 分類號: C12P19/40;C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 吉林省長春市新時代專利商標代理有限公司 22204
• 代理人: 丁洪學

1.一種可提高北冬蟲夏草發酵液中蟲草素產量的方法，其特征在于：使用北冬蟲夏草(Cordycepsmilitaris(L)Link)菌種，菌株保藏號為CGMCC NO.2909，通過如下步驟進行：

步驟S1：將北冬蟲夏草菌種接種到以蛋白胨、酵母浸粉為氮源，葡萄糖為碳源，KH₂PO₄·3H₂O、MgSO₄·7H₂O、ZnCl₂為礦物元素、VB₁為微量元素的種子培養基中，培養基組成為：蛋白胨15-20g/L，酵母浸粉16-25g/L，葡萄糖30-35g/L，KH₂PO₄·3H₂O 2g/L，MgSO₄·7H₂O 4g/L，ZnCl₂ 0.02g/L，VB₁0.1g/L；然后在轉速140-180rpm/min、溫度24-27℃的全溫振蕩器中深層發酵7-10天，獲得北冬蟲夏草的種子液；

步驟S2：取北冬蟲夏草種子液，按體積比6-10％的比例接種到以蛋白胨、酵母浸粉、硫酸銨為氮源，蔗糖為碳源，KH₂PO₄·3H₂O、MgSO₄·7H₂O、ZnCl₂為礦物元素、VB₁為微量元素的液體發酵培養基中，培養基組成為：蛋白胨5-15g/L，酵母浸粉16-25g/L，硫酸銨10-20g/L，蔗糖25-40g/L，KH₂PO₄·3H₂O 3g/L，MgSO₄·7H₂O 3g/L，ZnCl₂ 0.02g/L，VB₁0.1g/L；然后在轉速140-180rpm/min、溫度24-28℃的3L全自動發酵罐中深層發酵3-5天；

步驟S3：補料為質量比1:2-2:1的油酸和腺嘌呤混合物，其添加量為2.0-4.0g/L，補料流速為0.2mL/min，補料添加，后，在溫度24-28℃、轉速140-180rpm/min的條件下繼續發酵2-4天結束。

2.根據權利要求1所述的一種可提高北冬蟲夏草發酵液中蟲草素產量的方法，其特征在于，在發酵液中蟲草素提取方法為：發酵結束后，發酵產物經7000r/min離心10-15min獲得發酵液，在旋轉蒸發器中濃縮至原體積的1/3，加入3倍體積的工業酒精沉淀大分子多糖和蛋白質，上清液在45℃下進行真空干燥處理直至恒重，用粉碎機制成50目細粉；使用水微波方法提取蟲草素產品；提取溫度為70℃，固液質量體積比1:30(g/mL)，提取時間10min，微波功率550W。