[發明專利]一種地加瑞克乙?；s質的制備方法

在審

• 申請號: 202011237279.7
• 申請日: 2020-11-09
• 公開（公告）號: CN114456236A
• 公開（公告）日: 2022-05-10
• 發明（設計）人: 劉自成;張利香;李新宇;付玉清
• 申請（專利權）人: 深圳市健翔生物制藥有限公司
• 主分類號: C07K7/23
• 分類號: C07K7/23;C07K1/04;C07K1/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明提供了一種地加瑞克乙?；s質的制備方法，屬于多肽藥物制備領域。該方法包括以下步驟：1)以氨基樹脂為起始樹脂，按照地加瑞克肽序合成第n位至第10位的地加瑞克肽片段樹脂或地加瑞克肽樹脂，其中第4位氨基酸采用Fmoc?Ser?OH，其余采用相應的保護氨基酸或片段；2)使用乙酰化試劑進行乙酰化；3)繼續偶聯剩余氨基酸，獲得地加瑞克乙?；s質肽樹脂；若步驟1)中合成地加瑞克肽樹脂時，此步驟可省略；4)裂解，純化后得到地加瑞克乙?；s質：[Ser(Ac)⁴]degarelix；其中，n＝1、2或3。該方法純度高，收率高，為地加瑞克原料藥及其制劑的雜質分析及研究提供合格的雜質對照品，進一步提高了地加瑞克的生產和用藥安全。

技術領域

本發明屬于多肽藥物制備領域，特別涉及一種地加瑞克乙?；s質的制備方法。

背景技術

地加瑞克為含有7個非天然氨基酸的線性十肽，組成如下：

Ac-D-2Nal¹-D-4Cpa²-D-3Pal³-Ser⁴-4Aph(Hor)⁵-D-4Aph(Cbm)⁶-Leu⁷-Lys(iPr)⁸-Pro⁹-D-Ala¹⁰ -NH₂。地加瑞克(Degarelix)，商品名為Firmagon，是由丹麥輝凌(Ferring)公司開發，于2008年12月24日被美國FDA批準上市的一種促性腺激素釋放激素(GnRH)受體抑制劑類藥物。地加瑞克主要治療對象為晚期前列腺癌患者，其機制為通過抑制對前列腺癌持續生長至關重要的睪酮，從而達到延緩前列腺癌的生長和惡化的目的。

WO9846634為最早合成地加瑞克的專利，采用Boc保護氨基酸的固相合成方法合成醋酸地加瑞克。因成品的反離子為醋酸鹽，在儲存過程中，容易產生地加瑞克乙酰化雜質：[Ser(Ac)⁴]degarelix。該雜質結構式如下所示：

CN107569456提供了生產凍干的地加瑞克產品的方法。地加瑞克的物理化學表征顯示該十肽具有自聚集的能力，通常需要在6％～40％醋酸水溶液下凍干，但使用高濃度醋酸的樣品溶液進行凍干，容易產生地加瑞克乙?；s質。原料藥的穩定性試驗中也容易產生地加瑞克乙酰化雜質。本發明所提到的地加瑞克乙?；s質，如無特殊說明均為：[Ser(Ac)⁴] degarelix。

地加瑞克乙酰化雜質會影響藥物的穩定性和安全性，使藥物的活性降低，安全性風險升高。地加瑞克的制備、儲存過程中都極易產生地加瑞克乙?；s質，但目前沒有關于地加瑞克原料藥及制劑中該雜質合成方法的研究，缺少為地加瑞克的生產和用藥安全提供檢測方法及判定依據。在合成[Ser(Ac)⁴]degarelix過程中，有4個容易被乙酰化的氨基酸位點，分別為4位的Ser，5位的Aph(Hor)，6位的D-Aph(Cbm)和8位的Lys(iPr)，也是合成的難點所在。地加瑞克原料藥通常采用固相法合成，專利CN104177478采用tBu保護4位Ser側鏈羥基、專利CN109575109采用ψ^Me，Me保護4位Ser側鏈羥基、專利CN105524143采用Bzl 保護4位Ser側鏈羥基，側鏈保護基都是為了防止乙?；s質的產生。若按照常規方法將4 位Fmoc-Ser(Ac)-OH進行偶聯制備此雜質，該位點在脫Fmoc保護過程中，乙?；鶗w移至氨基上，使得下一步的偶聯反應失敗。若直接在地加瑞克原料藥中進行4位Ser側鏈乙?；?，又會帶來8位Lys(iPr)側鏈乙?；瘑栴}。因此，亟需開發一種高效的制備地加瑞克乙酰化雜質的制備方法。

發明內容

為解決上述問題，本發明提供了一種地加瑞克乙酰化雜質的制備方法。技術方案如下所述：

一種地加瑞克乙酰化雜質的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：