[發(fā)明專利]植物組織培養(yǎng)外植體消毒劑及其制備方法和使用方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011236937.0
• 申請(qǐng)日: 2020-11-09
• 公開（公告）號(hào): CN112369431B
• 公開（公告）日: 2022-03-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王桂蘭;王英;陳娜;張紅心;陳超
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 唐山師范學(xué)院
• 主分類號(hào): A01N61/00
• 分類號(hào): A01N61/00;A01P1/00;A01P3/00;A01H4/00
• 代理公司: 唐山科軒專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 13146
• 代理人: 王永紅

一種植物組織培養(yǎng)外植體消毒劑，其特征在于，所述消毒劑為木麻黃純化木醋液。這種消毒劑對(duì)植物組織培養(yǎng)中外植體上的細(xì)菌和真菌均有很好的殺滅作用，對(duì)外植體的損害和抑制作用較小，對(duì)環(huán)境無污染，制備方法簡單快捷，使用過程方便，適合大范圍推廣。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)外植體消毒領(lǐng)域，屬于純化木醋液應(yīng)用的技術(shù)領(lǐng)域，具體地說是一種植物組織培養(yǎng)外植體消毒劑、以及這種消毒劑的制備方法和使用方法。

背景技術(shù)

在植物組織培養(yǎng)技術(shù)中，植物外植體消毒成功與否是組培初代培養(yǎng)的技術(shù)關(guān)鍵。常用的外植體消毒劑有升汞（二氯化汞）、次氯酸鈉、次氯酸鈣等化學(xué)消毒劑，其中升汞作為外植體消毒劑效果很好，但有劇毒，對(duì)人畜有害且污染環(huán)境。次氯酸鈉和次氯酸鈣是具有強(qiáng)腐蝕性和強(qiáng)氧化性的含氯消毒劑，雖也有較好的消毒效果，但對(duì)使用者呼吸道有強(qiáng)烈的刺激，對(duì)環(huán)境也有較大污染。因此，對(duì)于植物組織培養(yǎng)外植體進(jìn)行殺菌消毒的試劑，如何能夠環(huán)保且高效，是本領(lǐng)域技術(shù)人員一直在研究和探索的課題。

木醋液是一種植物熱解和碳化產(chǎn)生的氣體經(jīng)冷凝和分離而獲得的有機(jī)液體成分，其中有機(jī)化學(xué)成分占10%-20%，主要是醋酸，含量占有機(jī)物總量的50%左右，其他有機(jī)化學(xué)成分則為酚類、醇類、醛類等。在17世紀(jì)中葉，木醋液是由歐洲的木材干餾工業(yè)而制得的，到18世紀(jì)80年代，日本引進(jìn)了木醋液。20世紀(jì)40年代，木醋液被美、日、韓等國家最先重視。木醋液在美國主要被用于林果業(yè)及花園園藝等方面；在日本主要被用于農(nóng)業(yè)、食品、醫(yī)藥等方面；在中國臺(tái)灣地區(qū)主要被用于促進(jìn)農(nóng)作物生長以及預(yù)防和治療病蟲害等方面；而在中國大陸地區(qū)對(duì)其研究與應(yīng)用比較晚，對(duì)其應(yīng)用主要集中在成分分析、提純及農(nóng)業(yè)等方面。前人研究表明，木醋液對(duì)真菌和細(xì)菌都有一定的抑制作用，有廣譜抑菌的效果，而木醋液對(duì)于動(dòng)物和人體未見毒害作用，因此木醋液在微生物防治等方面有廣闊的應(yīng)用前景。因此，木醋液在殺菌消毒方面的應(yīng)用成為本領(lǐng)域技術(shù)人員重要的研究課題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對(duì)背景技術(shù)中提及的技術(shù)缺陷，一是提供一種環(huán)保高效的植物組織培養(yǎng)外植體消毒劑，二是提供了這種消毒劑的制備方法，三是提供了這種消毒劑的使用方法。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：一種植物組織培養(yǎng)外植體消毒劑，其特征在于，所述消毒劑為木麻黃純化木醋液。

所述木麻黃純化木醋液含有機(jī)酸1.4-2.4%，酚類0.9-1.9%，酮類0.8-1.8%，酯類1.7-2.7%，其余為水。

所述消毒劑為木麻黃純化木醋液，該木麻黃純化木醋液的制備過程如下：

S1：選取木麻黃樹木枝杈，在300-600℃的溫度環(huán)境下進(jìn)行無氧熱裂解；

S2：步驟S1過程中所產(chǎn)生的煙氣經(jīng)冷卻和靜置后得到的酒紅色液體狀的木醋原液；

S3：步驟S2所獲得的木醋原液經(jīng)過濾、蒸餾，得到純化木醋液，即木麻黃純化木醋液。

步驟S1中，所選取的木麻黃樹木枝杈為樹木修剪下的新鮮或干燥的枝杈，截成5厘米左右。

步驟S2中，靜置時(shí)間為至少6個(gè)月。

植物組織培養(yǎng)外植體消毒劑的使用方法，所述消毒劑為木麻黃純化木醋液；其使用步驟如下：

S1、待消毒的植物組織外植體先用清水流水沖洗15-20分鐘后放置在超凈工作臺(tái)上，待用；

S2、將S1步驟中洗凈的外植體在75%的酒精中浸潤30秒；

S3、倒掉酒精，用稀釋之后的消毒劑浸泡S2得到的外植體6-10分鐘；

S4、取出浸泡后的外植體，再用無菌水沖洗3-4遍即可。

步驟S3中，消毒劑的稀釋倍數(shù)是4倍。