[發明專利]一種基于纖芯錯位干涉儀的核酸檢測方法

在審

• 申請號: 202011235462.3
• 申請日: 2020-11-06
• 公開（公告）號: CN112414972A
• 公開（公告）日: 2021-02-26
• 發明（設計）人: 鄧卉彤;沈常宇;陳瀟曼;康世奇
• 申請（專利權）人: 中國計量大學
• 主分類號: G01N21/45
• 分類號: G01N21/45;C12Q1/6825
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種基于纖芯錯位干涉儀的核酸檢測方法，所述的傳感器由光源(1)、單模光纖(2)、光譜儀(3)、粘連劑(4)、交聯劑(5)、核酸單鏈(6)、被測核酸單鏈(7)構成；其特征在于單模光纖(2)采用錯位結構熔接，單模光纖(2)為“上下上”錯位結構，下部錯位結構長度為3cm，上下錯位直徑約為25um；光源(1)耦合進單模光纖(2)內，單模光纖(2)與光譜儀(3)相連，用于實時觀察光譜變化；單模光纖(2)錯位的部分分別用粘連劑(4)與交聯劑(5)處理，之后將核酸單鏈(6)附著其上，檢測時在固定溫度下與待檢測核酸單鏈(7)進行結合，由此驗證兩條核酸單鏈是否能夠結合，檢測核酸單鏈是否是被測核酸單鏈的互補配對鏈；粘連劑(4)為10％3-氨丙基三乙氧基硅烷/硅烷偶聯劑，交聯劑(5)為2.3％戊二醛溶液；單模光纖(2)用去離子水沖洗3-5次后自然晾干，隨后置于粘連劑(4)中處理1小時，用丙酮漂洗4-6次洗去殘余的粘連劑(4)，然后將單模光纖(2)放入120℃烤箱中處理1-2小時；使用交聯劑(5)室溫交聯1-2小時，用20mmol/L磷酸鉀溶液連續漂洗4-6次，再用去離子水漂洗晾干；將單模光纖(2)浸于核酸單鏈(6)的雜交溶液，雜交液成分為引物原液加20％的去離子水，在30℃-37℃范圍內靜置5-10分鐘，取出后用去離子水進行漂洗并干燥；雜交時，用待檢測核酸單鏈(7)處理單模光纖(2)5分鐘，記錄光譜圖像；將單模光纖(2)升溫至75℃使得核酸單鏈(6)與待檢測核酸單鏈(7)解旋，隨后用去離子水進行3-5次漂洗去除單模光纖(2)上殘留的待檢測核酸單鏈(7)并干燥；選取濃度范圍從1％-90％待檢測核酸單鏈(7)依次處理單模光纖(2)并解旋，記錄不同濃度的待檢測核酸單鏈(7)處理時的光譜圖像，通過觀察光譜的漂移研究雜交濃度對特異性結合的影響，實現核酸檢測。