[發(fā)明專利]一種微針貼片及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011227837.1
• 申請(qǐng)日: 2020-11-06
• 公開（公告）號(hào): CN112321870B
• 公開（公告）日: 2022-11-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王彥波;傅玲琳;李歡;馮潔斯
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江工商大學(xué)
• 主分類號(hào): C08J7/04
• 分類號(hào): C08J7/04;C09D129/04;C09D7/61;C12Q1/6806;C08L27/18
• 代理公司: 浙江千克知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33246
• 代理人: 黎雙華

本發(fā)明屬于食品致敏原檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種微針貼片的制備方法，包括以下步驟：將金屬氧化物分散在MES緩沖液中，以制得金屬氧化物溶液；將聚乙烯醇添加至超純水中，并加入到金屬氧化物溶液中，通過攪拌以制得針體制作液；將針體制作液涂覆于微針模板上，以使針體制作液填充于微針模板；對(duì)微針模板進(jìn)行正壓處理、真空處理和恒溫干燥后進(jìn)行脫模，以得到微針貼片；本發(fā)明的微針貼片應(yīng)用于快速提取DNA中，能夠縮短提取時(shí)間，且提取的DNA無(wú)需純化可直接用于半定量檢測(cè)深加工食品中的致敏原，具有微創(chuàng)、提取時(shí)間短的優(yōu)點(diǎn)，操作簡(jiǎn)便，無(wú)需純化，方便后續(xù)操作。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于食品致敏原檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種微針貼片及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

食物過敏是人類日常生活中較為常見的一類健康問題。至今為止，對(duì)食物致敏原的檢測(cè)方法主要分為兩種，一是針對(duì)致敏性蛋白直接檢測(cè)致敏原，二是間接指示致敏原組分存在的DNA片段。雖然DNA容易降解，但在食物基質(zhì)中，與蛋白質(zhì)相比，DNA在加熱、壓力處理?xiàng)l件下能較長(zhǎng)時(shí)間保持穩(wěn)定，而且目標(biāo)DNA的降解速度要比蛋白質(zhì)慢很多，因此殘留組分致敏原特征性DNA能更好地指示致敏原的存在。

深加工食品由于食品成分復(fù)雜，除含有多種原料組分外，還含有鹽、糖、色素等食品添加劑。此外，加工過程中的煎、炸、煮等工藝也會(huì)使原料中的致敏性蛋白受到不同程度的損壞，因此加大了通過致敏性蛋白直接檢測(cè)致敏原方法的難度。目前，對(duì)食品中致敏原DNA進(jìn)行特異性檢測(cè)的最常見的方法是PCR和qRT-PCR技術(shù)，但在使用該檢測(cè)方法之前，通常需要采用多種裂解液來(lái)提取DNA，耗費(fèi)時(shí)間大約為4～5h，導(dǎo)致該方法的應(yīng)用受到限制。雖然目前市面上已有提取深加工食品中DNA的商業(yè)化試劑盒，但整個(gè)過程仍需要2～3h，因此研究快速前處理方法成為擴(kuò)大檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用范圍的重要方向。

微針貼片，即具有微米級(jí)尺寸的針狀突出物，其通常以陣列形式組裝到支撐襯底或者貼片上。鑒于目前國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道，微針貼片已成功運(yùn)用于疫苗接種、糖尿病治療以及皮膚疾病治療等方面，并且近年來(lái)已有研究表明，在不借助外界儀器的情況下，利用微針貼片的溶脹能力在吸取皮膚間質(zhì)液方面表現(xiàn)出良好的提取能力，因此微針貼片在食品特征性DNA快速分離提取中有一定的應(yīng)用潛力。

目前，硅材料、金屬材料、高分子材料等材料已被證明能夠用于微針貼片的制備，其中高分子材料以其原料來(lái)源廣泛，價(jià)格便宜，制備方法相對(duì)簡(jiǎn)單，適合于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)被廣泛用于制備微針貼片。聚乙烯醇(PVA)作為一種強(qiáng)吸水性的高分子材料，具有良好的生物相容性、耐化學(xué)性和機(jī)械強(qiáng)度。PVA凝膠及其衍生物是一種高度膨脹的材料，能在幾分鐘內(nèi)迅速吸收10～30％自身重量的水，從而聚乙烯醇成為微針材料研究的熱點(diǎn)。

由于用微針貼片提取DNA時(shí)存在一個(gè)無(wú)法避免的問題，即與共存蛋白質(zhì)相比，目標(biāo)核酸的濃度通常要低得多。根據(jù)目前國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道，許多納米材料可以強(qiáng)烈吸附DNA，包括各種金屬氧化物、氧化石墨烯、聚合離子液體、離子樹脂、殼聚糖、纖維素等。在上述材料中，金屬氧化物由于可以很好地與DNA的磷酸鹽骨架相互作用，因此將金屬氧化物運(yùn)用到微針貼片的制作中，有望提高微針貼片提取DNA的能力。

通過上述對(duì)致敏原檢測(cè)技術(shù)的現(xiàn)狀描述，以及微針貼片的制備材料和聚乙烯醇、金屬氧化物優(yōu)點(diǎn)的介紹，為此，有必要研制一種通過吸水溶脹的方式快速提取深加工食品中致敏原特征性DNA的微針貼片，以克服在快速食品致敏原檢測(cè)實(shí)際應(yīng)用中的不足。

發(fā)明內(nèi)容

基于現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述缺點(diǎn)和不足，本發(fā)明的目的之一是至少解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述問題之一或多個(gè)，換言之，本發(fā)明的目的之一是提供滿足前述需求之一或多個(gè)的一種微針貼片的制備方法。

本發(fā)明的目的之二是提供一種微針貼片。

本發(fā)明的目的之三是提供一種微針貼片的應(yīng)用方案。

為了達(dá)到上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

一種微針貼片的制備方法，包括以下步驟：