[發(fā)明專利]一種檢測貓冠狀病毒的試紙條及其制備方法、試劑盒、檢測方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202011226729.2 | 申請日: | 2020-11-06 |
| 公開(公告)號: | CN112415202A | 公開(公告)日: | 2021-02-26 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 王蓉蓉;馮小龍;孫云雷 | 申請(專利權(quán))人: | 愛若維生物科技(蘇州)有限公司 |
| 主分類號: | G01N33/577 | 分類號: | G01N33/577;G01N33/569;G01N33/558;G01N33/543;G01N33/52 |
| 代理公司: | 蘇州威世朋知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32235 | 代理人: | 楊林潔 |
| 地址: | 215123 江蘇省蘇州市中國(江蘇)自由貿(mào)易試驗(yàn)區(qū)*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 檢測 冠狀病毒 試紙 及其 制備 方法 試劑盒 | ||
1.一種檢測貓冠狀病毒的試紙條,所述試紙條包括底板(1),所述底板(1)上從左到右依次搭接樣品墊層(2)、膠體金墊層(3)、硝酸纖維素膜層(4)和吸水層(5),其特征在于,所述膠體金墊層(3)上包被有膠體金顆粒標(biāo)記的貓冠狀病毒單克隆抗體和貓傳染性腹膜炎病毒多克隆抗體;所述硝酸纖維素膜層(4)上包被有貓冠狀病毒單克隆抗體作為T1檢測線(41),還包被有貓傳染性腹膜炎病毒多克隆抗體作為T2檢測線(42),以及包被有羊抗雞IgG作為質(zhì)控線(43)。
2.如權(quán)利要求1所述的檢測貓冠狀病毒的試紙條,其特征在于,所述膠體金墊層(3)上包被的所述貓冠狀病毒單克隆抗體和所述貓傳染性腹膜炎病毒多克隆抗體的濃度為15μg/mL~25μg/mL;
T1檢測線(41)上所述貓冠狀病毒單克隆抗體的濃度為0.6mg/mL~1.2mg/mL;
T2檢測線(42)上所述貓傳染性腹膜炎病毒多克隆抗體的濃度為0.6mg/mL~1.2mg/mL;
質(zhì)控線(43)上所述羊抗雞IgG的濃度為1.0mg/mL~1.5mg/mL。
3.如權(quán)利要求1所述的檢測貓冠狀病毒的試紙條,其特征在于,所述貓冠狀病毒單克隆抗體和所述貓傳染性腹膜炎病毒多克隆抗體的比例為2:1。
4.如權(quán)利要求1所述的檢測貓冠狀病毒的試紙條,其特征在于,所述膠體金墊層(3)上還包被有膠體金顆粒標(biāo)記的雞抗貓IgY抗體。
5.如權(quán)利要求4所述的檢測貓冠狀病毒的試紙條,其特征在于,所述雞抗貓IgY抗體的濃度為10μg/mL~15μg/mL。
6.如權(quán)利要求1所述的檢測貓冠狀病毒的試紙條,其特征在于,所述硝酸纖維素膜層(4)粘貼到所述底板(1)的中間位置,在所述底板(1)上所述硝酸纖維素膜層(4)的一側(cè)粘貼吸水層(5),所述硝酸纖維素膜層(4)的另一側(cè)粘貼膠體金墊層(3)及樣品墊層(2),樣品墊層(2)一端壓住膠體金墊層(3)一端1.0mm~1.5mm,膠體金墊層(3)另一端壓住硝酸纖維素膜層(4)一端0.5mm~1mm,吸水層(5)的一端壓住硝酸纖維素膜層(4)另一端1.0mm~2.0mm。
7.一種權(quán)利要求1-6中任意一項(xiàng)所述的檢測貓冠狀病毒的試紙條的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:
S1、膠體金墊層(3)的制備:在膠體金墊上包被膠體金顆粒標(biāo)記的貓冠狀病毒單克隆抗體和貓傳染性腹膜炎病毒多克隆抗體;
S2、硝酸纖維素膜層(4)的制備:在硝酸纖維素膜層(4)上包被貓冠狀病毒單克隆抗體作為T1檢測線(41),還包被貓傳染性腹膜炎病毒多克隆抗體作為T2檢測線(42),以及包被羊抗雞IgG作為質(zhì)控線(43);
S3、樣品墊層(2)的制備:首先,配制處理液,含0.5%PEG20000、0.05%~0.2%Tween-20、0.01%~0.05%表面活性劑、0.3%~1.0%封閉劑的100mmol/L、pH9.0的Tris-HCL緩沖液;其次,將所述處理液涂布于玻璃纖維上,得到樣品墊層(2);
S4、試紙條的制備:在底板1上從左到右依次搭接步驟S3中的樣品墊層(2)、步驟S1中的膠體金墊層(3)、步驟S2中的硝酸纖維素膜層(4)和吸水層(5),即得檢測貓冠狀病毒的試紙條。
8.如權(quán)利要求6所述的檢測貓冠狀病毒的試紙條的制備方法,其特征在于,在所述膠體金墊上同時(shí)包被雞抗貓IgY抗體。
9.一種檢測貓冠狀病毒的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的檢測貓冠狀病毒的試紙條、取樣拭子和樣本稀釋液。
10.一種應(yīng)用權(quán)利要求9中所述的試劑盒檢測貓冠狀病毒的方法,其特征在于,包括如下步驟:
S1、將樣品置于樣品稀釋液中,充分混合靜置,取上清液為檢測液樣本;
S2、將檢測液樣本滴加到試劑盒的樣本孔中,靜置一段時(shí)間,判定結(jié)果。
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