[發明專利]一種多菌聯合發酵制備益生菌膳食補充劑的方法

在審

• 申請號: 202011225648.0
• 申請日: 2020-11-05
• 公開（公告）號: CN112335885A
• 公開（公告）日: 2021-02-09
• 發明（設計）人: 郭仁妹;黃潔;王健;韓峰
• 申請（專利權）人: 蘇州微克生活科技有限公司
• 主分類號: A23L33/135
• 分類號: A23L33/135;C12N1/20;C12R1/125;C12R1/25;C12R1/23;C12R1/225;C12R1/01
• 代理公司: 蘇州市中南偉業知識產權代理事務所(普通合伙) 32257
• 代理人: 楊慧林

本發明涉及發酵益生菌的技術領域，特別是涉及一種多菌聯合發酵制備益生菌膳食補充劑的方法，配料常見易于獲得，無需過多的復雜工序，產品營養均衡，包括以下步驟：S1、制取酶解液，備用；S2、制取培養基，備用；S3、制取優勢枯草芽孢桿菌和優勢乳酸菌菌種，備用；S4、將步驟S3中制得的優勢枯草芽孢桿菌接種至步驟S2中培養基中進行好氧發酵，接種比例為培養基重量的1％?2％，發酵溫度37攝氏度，發酵時間48小時，制得發酵液A；S5、將步驟S3中制得的優勢乳酸菌接種至步驟S4發酵液A中進行厭氧發酵，制得發酵液B；S6、發酵液B進行離心，收集菌泥，將菌泥重懸于生理鹽水，得到重懸液；S7、步驟S6中重懸液加入凍干保護劑。

技術領域

本發明涉及發酵益生菌的技術領域，特別是涉及一種多菌聯合發酵制備益生菌膳食補充劑的方法。

背景技術

膳食補充劑是一種旨在補充膳食的產品(而非煙草)，它可能含有一種或多種如下膳食成分，一種維生素、一種礦物質、一種草本(草藥)或其他植物、一種氨基酸、一種用以增加每日總攝入量來補充膳食的食物成分，或以上成分的一種濃縮物、代謝物、成分、提取物或組合產品等，也包括在得到批準、發證、許可前已作為膳食補充劑或食品上市的、已批準的新藥、維生素或生物制劑，DSHEA對膳食補充劑作為定義規定了其組成內容和標記要求：產品形式可以使丸劑、膠囊、片劑或液體。

益生菌是通過定殖在人體內，改變宿主某一部位菌群組成的一類對宿主有益的活性微生物。通過調節宿主黏膜與系統免疫功能或通過調節腸道內菌群平衡，促進營養吸收保持腸道健康的作用，從而產生有利于健康作用的單微生物或組成明確的混合微生物。

人類對微生物資源的利用曾經經歷過天然混菌培養至純種培養2個階段，純培養技術使得研究者擺脫了面對多種微生物共存的復雜局面能夠不受干擾的對單一目的菌株進行研究，但是，在長期的試驗和生產實踐中，發現很多重要的生化過程緊靠單種微生物不能完成或者只能微弱的進行，必須依靠2種或多種微生物共同培養來完成。

現有技術中，益生菌膳食補充劑多為多種物質的混合品，對身體健康影響不大，并且制作成本較高。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明提供一種多菌聯合發酵制備益生菌膳食補充劑的方法，配料常見易于獲得，無需過多的復雜工序，產品營養均衡，降低制作成本。

本發明的一種多菌聯合發酵制備益生菌膳食補充劑的方法，包括以下步驟：

S1、取干凈的豆粕、花生粕加入到高混機內，均勻混合后，粉碎，過篩，加水拌勻，添加豆粕和花生粕總重2％的絲氨酸蛋白酶，加入添加氫氧化鈉溶液將pH調節至9.0，并升溫至55攝氏度，水解3-6小時，然后降溫至50攝氏度，添加豆粕和花生粕總重3％的中性蛋白酶，添加稀鹽酸將pH調節至6.5，水解2-3小時，然后用120目濾網過濾除去雜質，并通過添加稀鹽酸或者氫氧化鈉溶液將pH調節至6.5-7.0，然后在溫度60攝氏度、均質壓力20-25Mpa的條件下，用高壓均質機均質3min，降溫至37攝氏度，制得酶解液備用；

S2、在步驟S1中酶解液再加入蛋白胨、瓊脂、磷酸二氫鉀、脫脂乳粉、白砂糖、檸檬酸以及硫酸亞鐵，并通過添加稀鹽酸或者氫氧化鈉溶液將pH調節至6.5-7.0，然后在高溫蒸汽下滅菌，降溫后制得培養基，備用；

S3、將枯草芽孢桿菌接種在步驟S2中培養基中進行劃線培養，選取優勢菌種，然后對優勢菌種進行擴大培養，備用；將乳酸菌接種在步驟S2中培養基中進行劃線培養，選取優勢菌種，然后對優勢菌種進行擴大培養，備用；

S4、將步驟S3中制得的優勢枯草芽孢桿菌接種至步驟S2中培養基中進行好氧發酵，接種比例為培養基重量的1％-2％，發酵溫度37攝氏度，發酵時間48小時，制得發酵液A；

S5、將步驟S3中制得的優勢乳酸菌接種至步驟S4發酵液A中進行厭氧發酵，接種比例為培養基重量的6％-9％，發酵溫度37攝氏度，發酵時間48小時，制得發酵液B；