[發明專利]一種早發冠心病基因檢測試劑盒

有效

• 申請號: 202011224721.2
• 申請日: 2020-11-05
• 公開（公告）號: CN112322718B
• 公開（公告）日: 2021-07-20
• 發明（設計）人: 劉哲;李九翔;張陸明;侯青;梁慶淵;劉鋒;趙娜娜;趙亮;師雙峰;劉昕超;惠汝太
• 申請（專利權）人: 百世諾（北京）醫療科技有限公司;百世諾（北京）醫學檢驗實驗室有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11
• 代理公司: 北京知呱呱知識產權代理有限公司 11577
• 代理人: 丁彥峰

本發明提供了一種突變基因，它是人類LDLR基因c.279_282dupGGAC雜合插入變異。還提供了檢測人類LDLR基因c.279_282dupGGAC雜合插入變異的相關試劑在制備早發冠心病的檢測試劑中的用途。本發明將LDLR基因c.279_282dupGGAC雜合插入變異應用于早發冠心病相關的基因檢測試劑盒的制備中，能達到臨床輔助診斷的目的。

技術領域

本發明涉及分子生物學技術領域，具體涉及一種早發冠心病基因檢測試劑盒。

背景技術

冠心病(coronary artery disease，CAD)是威脅人類健康的主要疾病之一。《中國心血管健康與疾病報告2019》指出，我國約有1100萬冠心病患者。早發冠心病(Prematurecoronary artery disease,PCAD)是冠心病的特殊形式，根據美國國家膽固醇教育計劃成人治療組第3次會議報告(NECP-ATPⅢ)規定：早發冠心病是指冠心病的發病年齡男性＜55歲，女性＜65歲。國內外研究表明，PCAD正以不低的比率在年輕人群中發病。PCAD發病前多無征兆、發病急、多表現為急性冠脈綜合征，死亡率高；因其特殊的年齡段，會給社會及家庭帶來沉重的經濟負擔。對于PCAD的傳統鑒別和診斷方法主要依靠生化檢查和影像學檢查，如B超檢查、冠狀動脈造影和心電圖檢查等。這些手段存在多種缺點，如檢查種類多、靈敏度和特異度低、易受藥物和精神狀況等因素的影響；檢測時間要求苛刻等。

55歲以前發生的PCAD，約5％～10％是由家族性高膽固醇血癥(familialhypercholesterolemia，FH)引起的，FH是PCAD常見的遺傳易感因素。FH又稱家族性高β脂蛋白血癥，其臨床特點是高膽固醇血癥、特征性黃色瘤、早發心血管疾病家族史。FH是兒童期最常見的遺傳性高脂血癥，也是脂質代謝疾病中最嚴重的一種，可導致各種危及生命的心血管疾病并發癥出現，是冠狀動脈疾病的一種重要危險因素。本病最特征的臨床表現為血LDL-C水平增高、黃色瘤、角膜弓和早發性冠心病。純合子的臨床表現比雜合子嚴重得多。FH患者的臨床表現取決于其基因型，非遺傳因素也對其有影響。FH基因型與表現型的關系比較復雜，即使帶有相同突變，甚至屬于同一家族的個體其臨床表現差異也較大。另外，非遺傳因素如高齡、男性、吸煙、飲食等也可顯著影響LDL水平，增加CAD的發生。

對FH患者的B型超聲檢查常可發現主動脈根部硬化，主動脈根部硬化逐漸加重，同時可出現主動脈瓣鈣化和(或)左冠狀動脈主干狹窄。15％患者有冠狀動脈瘤樣擴張(指冠狀動脈的局限或彌漫性擴張，其直徑超過了相鄰正常冠脈的1.5～2倍)，而年齡、性別配對的對照組(非FH冠心病患者)中僅2.5％有冠狀動脈瘤樣擴張。并同時發現冠狀動脈瘤樣擴張與血漿HDL-C水平呈負相關，因而認為FH者易發生冠狀動脈瘤樣性疾病。

目前，基因檢測是確診FH的一種新型手段，FH最常見的三種致病基因：LDLR、ApoB、PCSK9，也是PCAD的易感基因。由于基因檢測用于PCAD的情況較為少見，因此，任何一個或一組PCAD的相關基因的發現與提出都將是對本領域的重要技術貢獻。

發明內容

本發明提供一個新的LDLR基因的變異位點，及其檢測試劑盒，用于臨床(輔助)診斷早發冠心病，為攜帶早發冠心病致病變異的家庭提供遺傳阻斷，提高優生優育質量。

本發明通過對早發冠心病的家系成員進行分析，意料不到地發現了：家系中的早發冠心病患者具有LDLR基因c.279_282dupGGAC雜合插入變異，家系中的未患病成員均未檢測到該變異，說明該變異與早發冠心病密切相關。

以上發現通過相當數量的無關樣本得以驗證，樣本包括500名表型健康的對照成員和1例早發冠心病的患者成員。經驗證：500名表型健康的對照成員均未檢測到該變異；1例早發冠心病的患者成員檢測到LDLR基因c.279_282dupGGAC雜合插入變異。

進一步擴大陰性樣本數量，在擴大至1232名的隨機的表型健康的對照成員的志愿者樣本范圍內，均未檢測到該變異。