[發(fā)明專利]氫巰基氧化酶1激動劑和索拉菲尼聯(lián)合在制備治療肝癌細胞中的應(yīng)用

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• 申請日: 2020-11-05
• 公開（公告）號: CN112190712A
• 公開（公告）日: 2021-01-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 孫嘉磊;周海軍
• 申請（專利權(quán)）人: 復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院
• 主分類號: A61K45/06
• 分類號: A61K45/06;A61K38/44;A61K48/00;A61K31/44;A61P1/16;A61P35/00;C12N15/867;C12N15/53
• 代理公司: 上海伯瑞杰知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31227
• 代理人: 范艷靜

本發(fā)明提供了一種氫巰基氧化酶1激動劑和索拉菲尼聯(lián)合在制備治療肝癌細胞中的應(yīng)用，其中，氫巰基氧化酶1激動劑包括過表達氫巰基氧化酶1的慢病毒和重組氫巰基氧化酶1蛋白，首先構(gòu)建過表達氫巰基氧化酶1的慢病毒，然后轉(zhuǎn)染靶細胞，氫巰基氧化酶1激動劑的劑型包括口服制劑、針劑或緩釋制劑等；本發(fā)明同時使用過表達QSOX1慢病毒和索拉非尼對肝癌細胞作用，QSOX1不僅能抑制肝癌細胞活力，還能更加明顯地減少GSH含量，增加細胞內(nèi)游離亞鐵離子和脂質(zhì)過氧化水平，從而促進細胞鐵死亡；故過表達QSOX1慢病毒聯(lián)合索拉非尼能夠協(xié)同促進對腫瘤生長的抑制作用，具有更強的殺傷作用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種氫巰基氧化酶1激動劑和索拉菲尼聯(lián)合在制備治療肝癌細胞中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

肝癌在2018年全球惡性腫瘤新發(fā)病例中排名第六位，死亡病例數(shù)排名第四位，是一種兇險的消化系統(tǒng)惡性腫瘤。盡管在腫瘤早期病人，尤其是“小肝癌”的病人，通過外科手術(shù)治療可以取得較好的預(yù)后，但由于肝癌往往起病隱匿，被確診時大多已是中晚期，病人因此失去根治性手術(shù)機會，其自然病程約3至6個月。對于這部分病人只能進行姑息性治療和系統(tǒng)化學(xué)治療，預(yù)后極差。

索拉非尼是目前肝癌治療指南中推薦的一線用藥，主要用于中晚期肝癌患者，也用于接收肝癌切除術(shù)患者的術(shù)后輔助治療。但其平均只能使生存期延長約2.8個月，治療效果仍十分有限。因此，若能打破肝癌細胞對索拉非尼的治療抵抗將對中晚期肝癌的臨床治療具有重要意義。早有研究發(fā)現(xiàn)，索拉非尼除了能夠抑制多靶點激酶外，同時還能夠誘導(dǎo)腫瘤細胞鐵死亡從而殺傷腫瘤細胞。利用細胞鐵死亡機制殺傷腫瘤并不是全新的概念，但由于腫瘤細胞往往自身發(fā)展出強大的抗氧化能力，利用鐵死亡治療腫瘤的效果并不是很理想。

細胞鐵死亡是新近發(fā)現(xiàn)的一種細胞死亡方式，也是目前細胞死亡領(lǐng)域研究的熱點。如何通過加強鐵死亡來提高索拉非尼的療效，研究很少，尚沒有報道通過鐵死亡增加索拉非尼療效的制劑和方法。另外，鐵死亡依賴于細胞內(nèi)的鐵和抗氧化能力的減弱。在一些腫瘤中已證實誘導(dǎo)癌細胞的鐵死亡較誘導(dǎo)凋亡等其他形式的死亡更容易，易于臨床推廣。

氫巰基氧化酶1(Sulfhydryl oxidase 1,QSOX1)是一種能夠催化蛋白分子中自由巰基生成二硫鍵的酶類，參與蛋白質(zhì)翻譯后折疊影響其生物學(xué)功能。近年來越來越多的研究發(fā)現(xiàn) QSOX1蛋白與腫瘤密切相關(guān)。現(xiàn)有技術(shù)已研究證實QSOX1在肝癌中扮演著抑癌基因的角色，但對其在肝癌細胞中參與的生物功能仍不完全清楚，目前也尚未有應(yīng)用QSOX1激動劑與索拉非尼聯(lián)用提高肝癌治療效果的報道。

發(fā)明內(nèi)容

針對目前中晚期肝癌的治療方案難以有效控制腫瘤生長和病情進展，而索拉非尼治療肝癌的效果也十分有限，本發(fā)明提供了QSOX1激動劑與索拉菲尼聯(lián)用在提高肝癌治療效果中的應(yīng)用。

索拉非尼對肝癌細胞的殺傷主要靠誘導(dǎo)鐵死亡，而肝癌細胞對索拉非尼誘導(dǎo)的鐵死亡產(chǎn)生耐受，使肝癌對索拉非尼治療不敏感。我們在體外細胞實驗和肝癌移植動物模型中證實 QSOX1增強肝癌細胞對索拉非尼的敏感性及對腫瘤的殺傷作用，所以使用慢病毒轉(zhuǎn)染等方法提高QSOX1基因轉(zhuǎn)錄，使腫瘤細胞產(chǎn)生更多的QSOX1蛋白，以增加腫瘤細胞對索拉非尼的敏感性。或使用重組QSOX1蛋白與索拉非尼聯(lián)用，以增加索拉非尼對肝癌的殺傷力。本發(fā)明的 QSOX1激動劑是具有QSOX1蛋白活性的物質(zhì)，或能提高QSOX1基因轉(zhuǎn)錄的物質(zhì)，例如人重組QSOX1蛋白；使用慢病毒轉(zhuǎn)染等方法提高QSOX1基因轉(zhuǎn)錄。由于慢病毒過表達翻譯產(chǎn)生的 QSOX1蛋白與重組QSOX1蛋白都經(jīng)過真核生物細胞內(nèi)蛋白折疊形成，兩者都具有QSOX1生物活性，因此作為激動劑使用。

為達到上述目的，本發(fā)明的解決方案是：

一種氫巰基氧化酶1激動劑和索拉菲尼聯(lián)合在制備治療肝癌細胞中的應(yīng)用。

進一步地，氫巰基氧化酶1激動劑選自過表達氫巰基氧化酶1的慢病毒和重組氫巰基氧化酶1蛋白中的一種以上。