[發(fā)明專利]一種木芙蓉葉黃酮成分鑒定方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011223802.0
• 申請(qǐng)日: 2020-11-05
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112697549A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-04-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 程鵬
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 重慶醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N1/28
• 分類號(hào): G01N1/28;G01N21/31;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 重慶憨牛知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 50261
• 代理人: 蒲艷紫

本發(fā)明屬于成分含量鑒定技術(shù)領(lǐng)域，提供了一種木芙蓉葉黃酮成分鑒定方法。包括如下步驟：a、確定黃酮成分標(biāo)準(zhǔn)品；b、總黃酮提取工藝取得總黃酮提取液；c、紫外?可見(jiàn)分光光度法測(cè)定總黃酮含量；d、分離成分，采用梯度洗脫法為總黃酮提取液進(jìn)行分離；f、對(duì)分離品進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。實(shí)際運(yùn)用中，通過(guò)上述的一種木芙蓉葉黃酮成分鑒定方法，以確定木芙蓉葉的采收期，方便采收，提高黃酮提取量。該方式結(jié)果準(zhǔn)確，適用于中藥農(nóng)用推廣。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及成分含量鑒定技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種木芙蓉葉黃酮成分鑒定方法。

背景技術(shù)

植物木芙蓉的干燥葉，有涼血解毒,消腫止痛的功效，用于治療癰疽喉腫,纏身蛇丹,燙傷，目赤腫痛，跌打損傷[4]。現(xiàn)代研究表明其具有抑菌[5-6]，抗病毒]，抗腫瘤等作用。2015版《中國(guó)藥典》載其定量測(cè)蘆丁含量，作為質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)生產(chǎn)上藥農(nóng)習(xí)以測(cè)定成分的高低作為確定采收期的標(biāo)志。但是否蘆丁為其特征性活性成分尚無(wú)確切的研究說(shuō)明。因此木芙蓉采收期的選擇依據(jù)缺乏。通過(guò)對(duì)黃酮含量的動(dòng)態(tài)變化對(duì)木芙蓉葉進(jìn)行多方面考察，以確定其最佳采收期。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，本發(fā)明提供一種木芙蓉葉黃酮成分鑒定方法，以確定木芙蓉葉的采收期。包括如下步驟：a、確定黃酮成分標(biāo)準(zhǔn)品； b、總黃酮提取工藝取得總黃酮提取液；c、紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定總黃酮含量；d、分離成分，采用梯度洗脫法為總黃酮提取液進(jìn)行分離；f、對(duì)分離品進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

進(jìn)一步的，還包括重復(fù)鑒定，分別在采收期4月至10月內(nèi)，每月重復(fù)鑒定。

進(jìn)一步的，所述步驟a中以蘆丁、金絲桃苷、槲皮苷、槲皮素和加山奈酚為參考成分。

進(jìn)一步的，所述步驟b中超聲將，精密稱取的蘆丁、金絲桃苷、槲皮苷、槲皮素和加山奈酚，溶解于50％乙醇溶液中。

進(jìn)一步的，所述步驟d中，將Hypersil ODS-C18為固定相；乙腈(A)冰醋酸酸水溶液（B）為流動(dòng)相。

進(jìn)一步的，所述步驟f包括單因素方差分析和因子分析，先對(duì)分離成分中的蘆丁、金絲桃苷、槲皮苷、槲皮素和加山奈酚進(jìn)行單因素方差分析，再對(duì)蘆丁、金絲桃苷、槲皮苷、槲皮素和加山奈酚進(jìn)行因子分析。

由上述技術(shù)方案可知，本發(fā)明提供的一種木芙蓉葉黃酮成分鑒定方法的有益效果：（1）確定標(biāo)準(zhǔn)品，使得檢測(cè)范圍更大，更容易確定采集期內(nèi)的黃酮變化，更有利于方便鑒定黃酮變化。（2）通過(guò)采取總黃酮的提取工藝取得總黃酮提取液，該方式能夠有效的獲得總黃酮提取液。（3）通過(guò)對(duì)分離品進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，使得在實(shí)際運(yùn)用中，能夠有效的獲得檢測(cè)數(shù)據(jù)。

附圖說(shuō)明

為了更清楚地說(shuō)明本發(fā)明具體實(shí)施方式，下面將對(duì)具體實(shí)施方式或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡(jiǎn)單地介紹。在所有附圖中，各元件或部分并不一定按照實(shí)際的比例繪制。

圖1為不同采收期木芙蓉葉總黃酮含量μg/ml；

圖2為四種對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)曲線；

圖3為四種黃酮類成分在不同溫度下的峰面積RSD；

圖4為不同采收期木芙蓉葉樣品中黃酮類成分含量的比例％；