[發(fā)明專利]一種松花粉中柚皮素HPLC含量測定方法

在審

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• 申請日: 2020-11-05
• 公開（公告）號: CN112268973A
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 潘一峰;張玉杰;李榮勝;林超穎
• 申請（專利權(quán)）人: 上海黃海制藥有限責(zé)任公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 上海泰能知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31233
• 代理人: 魏峯

本發(fā)明涉及一種松花粉中柚皮素HPLC含量測定方法，建立了松花粉中柚皮素成分的含量測定方法，并對多個產(chǎn)地松花粉柚皮素進行了含量測定，具有操作簡便、快速、專屬性強、重復(fù)性好的特點；柚皮素在松花粉中含量穩(wěn)定且高，故可作為松花粉藥材質(zhì)量控制的指標(biāo)成分，對松花粉的研究具有重要意義，有助于藥材后續(xù)研究，有利于扶正化瘀片/膠囊等中藥及其他含松花粉保健品的質(zhì)量控制和表征。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于松花粉測定領(lǐng)域，特別涉及一種松花粉中柚皮素HPLC含量測定方法。

背景技術(shù)

松花粉為松科植物馬尾松(Pinus massoniana Lamb.)、油松(Pinustabulieformis Carr.)或同屬數(shù)種植物的干燥花粉。松花粉別名松黃、松花，是我國傳統(tǒng)的藥食兩用藥材之一，具有收斂止血，燥濕斂瘡的功效，可用于外傷出血、皮膚糜爛、濕疹、黃水瘡等癥。松花粉是中藥扶正化瘀片/膠囊(國藥準(zhǔn)字Z20020047/Z20050573)原料藥材之一，也是松花粉靈芝片、松花粉蒲公英顆粒等保健品的原材料之一。松花粉通常于春季花剛開時進行采摘，花穗曬干，收集花粉，除去雜質(zhì)即得。干燥的松花粉呈光滑橢圓狀，淡黃色，體質(zhì)輕，易飛揚，手感滑潤，不沉于水，氣微香，味有油膩感，其營養(yǎng)豐富，含多種維生素類、多糖類、黃酮類、核酸類、脂肪酸類、氨基酸類，膳食纖維類等營養(yǎng)物質(zhì)，有“花粉之王”之美稱。

松花粉于1985年就已被《中國藥典》收載，而《中國藥典》、《上海市中藥飲片炮制規(guī)范》等各省、地方標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)中只有性狀、顯微鑒別、水分、總灰分等質(zhì)量控制項目。未對松花粉進行化學(xué)成分含量測定的控制和表征。因此有必要建立松花粉含量測定方法，用以控制和表征松花粉質(zhì)量。研究表明，黃酮類成分屬于松花粉的主要活性成分，總黃酮含量高達1.60％～2.95％。松花粉中二氫黃酮類化合物柚皮素(C₁₅H₁₂O₅)，具有降血脂、抗菌、抗氧化、抗腫瘤、抗癌、抗纖維化等多種藥理活性，具有良好的藥用價值。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種松花粉中柚皮素HPLC含量測定方法，該方法具有操作簡便、快速、專屬性強、重復(fù)性好的特點。

本發(fā)明提供了一種松花粉中柚皮素HPLC含量測定方法，包括：

(1)取供試品加入乙醇溶液溶解，加熱回流，過濾，取濾液得到供試品溶液；

(2)取柚皮素對照品加入甲醇溶解，制得對照品溶液；

(3)分別吸取供試品溶液和對照品溶液，進行HPLC測定；其中，色譜條件為：色譜柱為C18色譜柱；流動相為甲醇-0.05％磷酸溶液；柱溫為20-40℃；檢測波長為285-303nm；流速為0.5-2ml/min；進樣量為1-20μl；理論塔板數(shù)按柚皮素峰計算應(yīng)不低于3000。

所述步驟(1)中的乙醇濃度為60-80％。

所述步驟(1)中的加熱回流時間為1-2.5h。

所述步驟(2)中的甲醇濃度為80-100％。

所述步驟(3)中的甲醇與0.05％磷酸溶液的體積比為45:55，流動相甲醇可在其相對值±30％的范圍內(nèi)進行調(diào)整，0.05％磷酸溶液隨之進行調(diào)整。

所述步驟(3)中的檢測波長為288nm。

所述步驟(2)中將柚皮素對照品逐級稀釋成9.3、15.6、25.9、43.2、72.0、120.0、200.0μg/ml7個不同等級的質(zhì)量濃度，分別測定峰面積，以柚皮素質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，柚皮素峰面積為縱坐標(biāo)，進行線性回歸。

有益效果