[發明專利]曲唑酮的檢測方法

有效

• 申請號: 202011222453.0
• 申請日: 2020-11-05
• 公開（公告）號: CN112305134B
• 公開（公告）日: 2022-07-12
• 發明（設計）人: 劉杏立;賈永娟;倪君君
• 申請（專利權）人: 北京和合醫學診斷技術股份有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 濟南信達專利事務所有限公司 37100
• 代理人: 李世喆

1.曲唑酮的檢測方法，其特征在于，包括：

制備至少三種濃度的標準溶液，其中，所述標準溶液為具有曲唑酮和內標物的溶液，所述至少三種濃度的標準溶液中的內標物的量相同；

利用液相色譜儀在預設的檢測條件下分別檢測每一種所述標準溶液，獲得每一種所述標準溶液對應的第一檢測結果；

根據各個所述第一檢測結果、所述標準溶液中曲唑酮的濃度和內標物的濃度，擬合曲唑酮的標準曲線方程；

對待處理樣品進行離心處理，取離心后的第一上清液；

向所述第一上清液內加入內標物，渦旋混勻，順次加入蛋白沉淀劑，對所述第一上清液進行蛋白沉淀，得到待測樣品；

利用液相色譜儀在所述檢測條件下檢測所述待測樣品，獲得所述待測樣品的第二檢測結果；

基于所述標準曲線方程和所述第二檢測結果，得到所述待測樣品中曲唑酮的濃度；

所述檢測條件中的液相條件，包括：洗脫流動相中的水相與有機相的體積比為35:65-50:50；

C18反相色譜柱；

洗脫流動相中的水相包括：含有磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉的水溶液；

洗脫流動相中的有機相包括：乙腈溶液；

柱溫為35-45℃；

流速為0.8-1.2 mL/min；

所述向所述第一上清液內加入內標物，渦旋混勻，順次加入蛋白沉淀劑，對所述第一上清液進行蛋白沉淀，得到待測樣品，包括：

向所述第一上清液內加入內標物，在1500-2000 rpm的轉速下渦旋混合0.5-1.5 min；

順次加入蛋白沉淀劑，在1500-2000 rpm的轉速下渦旋混合4-6 min，并在10000-15000rpm的轉速下高速離心8-12 min，取離心后的第二上清液作為待測樣品。

2.根據權利要求1所述的曲唑酮的檢測方法，其特征在于，

所述檢測條件中的熒光檢測條件，包括：

激發波長：320 nm；發射波長：440 nm。

3.根據權利要求1所述的曲唑酮的檢測方法，其特征在于，

所述標準曲線方程的兩個變量分別為：所述標準溶液中曲唑酮的色譜峰面積與內標物的色譜峰面積的比值，以及所述標準溶液中曲唑酮的濃度與內標物的濃度的比值。

4.根據權利要求1所述的曲唑酮的檢測方法，其特征在于，

所述蛋白沉淀劑包括：乙腈溶液和/或甲醇溶液。

5.根據權利要求4所述的曲唑酮的檢測方法，其特征在于，

所述第一上清液與所述蛋白沉淀劑的體積比為1:3-1:12。

6.根據權利要求1所述的曲唑酮的檢測方法，其特征在于，

所述對待處理樣品進行離心處理，取離心后的第一上清液，包括：

將待處理樣品在3000-4000 rpm的轉速下離心8-12 min，取離心后的上清液作為第一上清液。

7.根據權利要求1至6中任一所述的曲唑酮的檢測方法，其特征在于，

所述內標物為2-萘酚。