[發明專利]一種高靈敏度總抗氧化能力檢測試劑盒及其使用方法

在審

• 申請號: 202011221282.X
• 申請日: 2020-11-05
• 公開（公告）號: CN112485210A
• 公開（公告）日: 2021-03-12
• 發明（設計）人: 董垚;戴琦
• 申請（專利權）人: 武漢菲恩生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31
• 代理公司: 武漢紅觀專利代理事務所(普通合伙) 42247
• 代理人: 張文俊

本發明公開了一種高靈敏度總抗氧化能力檢測試劑盒及其使用方法，屬于生物醫藥檢測技術領域。本發明提供的高靈敏度總抗氧化能力檢測試劑盒包括試劑A、試劑B、試劑C、FeSO4·7H₂O粉末、陽性對照TCEP?HCl溶液和尿酸酶，采用該試劑盒檢測總抗氧化能力，具有檢測靈敏度高、穩定性強的特點，將其應用到血清較少的小型野生動物的血清樣本中，可以得到較為精確的結果，有利于在市場中進一步的推廣使用。

技術領域

本發明涉及生物醫藥檢測技術領域，尤其涉及一種高靈敏度總抗氧化能力檢測試劑盒及其使用方法。

背景技術

生物體的細胞內會產生多種抗氧化劑，例如谷胱甘肽，α-生育酚，抗壞血酸，超氧化物歧化酶，過氧化氫酶，過氧化物酶等，以防止活性氧ROS潛在的有害作用。目前已經開發出多種測定法來測量特定抗氧化劑的濃度以及生物體細胞內存在的所有抗氧化劑的濃度。不同于其他間接檢測法，還原鐵抗氧化能力FRAP法能直接檢測量樣品中抗氧化劑對氧化作用抑制的能力。其原理是在低pH值下，樣品中的抗氧化劑將Fe³⁺-TPTZ絡合物還原為Fe²⁺-TPTZ，呈現藍色。著色強度與樣品中大多數非酶類抗氧化劑的還原能力成正比，因此可測量總體抗氧化能力。

FRAP法簡單，快速，便宜且穩定，已廣泛用于農業、營養以及生態研究的各個領域。在FRAP分析中，不需要樣品預處理，化學計量因子恒定，線性范圍寬，重現性極佳，靈敏度高。檢測過程不需要高度專業的設備或技能，也不需要嚴格控制時間和反應條件。然而對于血液樣本來說，采用FRAP法測量多個抗氧化劑并估算其精度通常需要的樣本量太大，這使得研究人員難以對小型野生動物的抗氧化特征進行全面分析。

發明內容

有鑒于此，本發明提出了一種準確性、穩定性好、靈敏度高的一種高靈敏度總抗氧化能力檢測試劑盒。

本發明的技術方案是這樣實現的：本發明提供了一種高靈敏度總抗氧化能力檢測試劑盒，包括：試劑A、試劑B、試劑C、FeSO₄·7H₂O粉末、陽性對照TCEP-HCl溶液和尿酸酶。

在以上技術方案的基礎上，優選的，所述試劑A包括醋酸溶液和醋酸鈉溶液，試劑B包括TPTZ溶液和HCl溶液，試劑C包括FeCl₃溶液和Tris-HCl溶液，上述溶液的溶劑為去離子水。

在以上技術方案的基礎上，優選的，所述醋酸溶液體積分數為1％-5％，醋酸鈉溶液濃度為5-50mmol/L。

在以上技術方案的基礎上，優選的，所述TPTZ溶液濃度為5-50mmol/L，HCl溶液濃度為10-100mmol/L。

在以上技術方案的基礎上，優選的，所述FeCl₃溶液濃度為5-50mmol/L，Tris-HCl溶液濃度為5-40mmol/L。

在以上技術方案的基礎上，優選的，所述陽性對照TCEP-HCl溶液濃度是10-20mmol/L。

在以上技術方案的基礎上，優選的，所述尿酸酶濃度為1-5U/ml。

在以上技術方案的基礎上，優選的，所述的一種高靈敏度總抗氧化能力檢測試劑盒的使用方法，其特征在于，步驟如下：

S1，所述FeSO₄·7H₂O用去離子水溶解，配置濃度為0、0.25、0.50、0.75、1.00、1.50mmol/L的標準溶液；

S2，所述試劑A、試劑B、試劑C以體積比為10:1:1的比例混合，配成工作液；