[發明專利]一種玉米葉黃化基因oy2以及與其連鎖的InDel分子標記和應用

在審

• 申請號: 202011220380.1
• 申請日: 2020-11-05
• 公開（公告）號: CN112210560A
• 公開（公告）日: 2021-01-12
• 發明（設計）人: 袁廣勝;沈亞歐;潘光堂;何慧;楊焱;王智穎;史家豪;陳本芳;馬浪浪;鄒超英
• 申請（專利權）人: 四川農業大學
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C12N15/11;C12Q1/6895
• 代理公司: 北京正華智誠專利代理事務所(普通合伙) 11870
• 代理人: 何凡

1.一種玉米葉黃化基因oy2，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根據權利要求1所述的玉米葉黃化基因oy2，其特征在于，所述基因在編碼區第十三個外顯子上發生一個單堿基突變，突變位點為G/A。

3.根據權利要求1所述的玉米葉黃化基因oy2，其特征在于，所述基因編碼的蛋白質的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

4.一種與基因oy2連鎖的InDel分子標記，其特征在于，所述InDel分子標記定位于玉米5號染色體上，其核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。

5.一種用于擴增權利要求3所述的InDel分子標記的引物對，其特征在于，所述引物對的具體序列如下：

InDel-F：GAATTGGTTTGCGCCACAGT；

InDel-R：TGTTTATTCTTCAAGGCTGTCAGA。

6.一種篩選黃化葉玉米的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)提取待測玉米DNA；

(2)采用權利要求4所述的引物對待測基因進行PCR擴增；

(3)對擴增產物進行測序，如若擴增產物在突變位點的核苷酸堿基為A/A，則其為黃化葉玉米。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述PCR程序為：94℃預變性2min；98℃變性10s；60℃退火30s；68℃延伸5s；共35個循環；68℃再延伸10min。

8.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述PCR反應體系為：Taq Mix7.5μL，上下游引物分別為0.75μL，DNA模板1μL，用雙蒸水定容至15μL。

9.一種篩選黃化葉玉米的試劑盒，其特征在于，包括權利要求4所述分子標記，和/或權利要求5所述的引物對。

10.一種玉米全基因組芯片，其特征在于，包括權利要求4所述的分子標記。