[發(fā)明專利]一種用于高效血管化的材料及其制備方法和應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011215704.2
• 申請日: 2020-11-04
• 公開（公告）號: CN112316213B
• 公開（公告）日: 2022-09-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄧旭亮;郭亞茹;張學慧
• 申請（專利權(quán)）人: 北京大學口腔醫(yī)學院
• 主分類號: A61L27/50
• 分類號: A61L27/50;A61L27/26
• 代理公司: 北京怡豐知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11293
• 代理人: 于振強

本發(fā)明涉及一種用于高效血管化的材料及其制備方法和應用，其解決了現(xiàn)有材料在促進血管再生中的副作用，其含有HtrA3蛋白。本發(fā)明同時提供了其制備方法和應用。本發(fā)明可用于高效血管化的材料領(lǐng)域。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種生物材料及其制備方法和應用，具體說是一種用于高效血管化的材料及其制備方法和應用。

背景技術(shù)

血管再生是指從原有的血管以出芽的方式形成新的血管的過程。血管再生是一個高度有序的過程，對很多生理和病理過程都十分重要，如胚胎發(fā)育、組織修復、腫瘤形成等。一旦血管再生被啟動，向外生長的毛細血管是由一種特殊的被稱為“尖端細胞”的細胞帶領(lǐng)，后面跟隨者莖細胞。在血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的刺激下，尖端細胞伸出長的且具有動態(tài)變化特性的絲狀偽足。利用伸向細胞外機制的絲狀偽足，尖端細胞具有探測周圍環(huán)境并帶莖細胞定向移動的能力。此外，絲狀偽足的融合可導致新的血管分支的形成，過多的尖端細胞可導致超支化的血管網(wǎng)絡(luò)。因此，尖端細胞和莖細胞的分化是控制血管再生的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

隨著對血管再生研究的深入，一些傳統(tǒng)的促進血管再生的細胞因子，如VEGF，bFGF已經(jīng)應用于促進缺血區(qū)域的血管再生了。但是這些傳統(tǒng)的細胞因子用于治療性血管再生因其非特異性有很多副作用，比如病理性血管再生、纖維化、血栓形成等。同樣地，因VEGF和其受體在正常的血管內(nèi)皮上也有生理功能，阻斷這些受體會導致正常功能的破壞。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明就是為了解決現(xiàn)有材料在促進血管再生中存在副作用的技術(shù)問題，提供一種對促進血管再生效果較好的用于高效血管化的材料及其制備方法和應用。

為此，本發(fā)明提供一種用于高效血管化的材料，其含有HtrA3蛋白。

優(yōu)選的，其還含有IV型膠原。

優(yōu)選的，所述有IV型膠原的濃度為0～8mg/ml。

優(yōu)選的，所述HtrA3蛋白的濃度為0.1～100μg/ml。

本發(fā)明同時提供一種用于高效血管化的材料的制備方法，其含有如下步驟：(1)將含有IV型膠原的原料(如基質(zhì)膠、IV型膠原、明膠等)原料制備成含有濃度0～8mg/ml的IV型膠原液；(2)將HtrA3蛋白制備成0.1～10mg/ml的HtrA3蛋白液；(3)將所述步驟(1)制得的IV型膠原液與所述步驟(2)制得的HtrA3蛋白液混合，固化，制得用于高效血管化的材料。

優(yōu)選的，所述步驟(3)中，加入血管內(nèi)皮細胞。

本發(fā)明同時提供一種用于高效血管化的材料在用于促進血管再生材料中的應用；

本發(fā)明具有以下有益效果：

1.將IV型膠原與HtrA3蛋白混合后，Western顯示IV型膠原發(fā)生明顯降解；

2.將基質(zhì)膠與HtrA3蛋白液混合后可發(fā)現(xiàn)明顯β1整合素的吸附，說明β1整合素結(jié)合位點的暴露；

3.體內(nèi)應用100μg/ml的HtrA3溶液三天，可明顯促進大鼠顱骨缺損區(qū)域的血管再生。與對照組相比，應用了HtrA3溶液的顱骨缺損處內(nèi)皮細胞的數(shù)量多了2倍。

附圖說明

圖1是本發(fā)明中，IV型膠原被HtrA3分解圖；

圖2是本發(fā)明中，被HtrA3分解后，IV型膠原β1整合素結(jié)合位點暴露圖；

圖3A和圖3B是2.5％明膠加入0.1μg/mlHtrA3蛋白液可明顯促進人臍靜脈內(nèi)皮細胞球的出芽：其中圖3A為兩組內(nèi)皮細胞球鋪展圖；圖3B為對兩組細胞球的定量分析顯示HtrA3可促進細胞球的侵襲距離和出芽的數(shù)目。(標尺：200μm)