[發明專利]一種人運動神經元基因拷貝數相對定量檢測方法及試劑盒

在審

• 申請號: 202011215487.7
• 申請日: 2020-11-04
• 公開（公告）號: CN112280848A
• 公開（公告）日: 2021-01-29
• 發明（設計）人: 龐博
• 申請（專利權）人: 北京邁基諾基因科技股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6851;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 張立娜

1.一種人運動神經元基因拷貝數相對定量檢測試劑盒，含有單鏈DNA組A和/或單鏈DNA組B：

所述單鏈DNA組A由引物對A、探針A1和探針A2組成；

所述引物對A為特異性檢測SMN1基因和SMN2基因第7外顯子的共用引物，由SEQ IDNo.1所示的上游引物SMN-EX7-F和SEQ ID No.2所示的下游引物SMN-EX7-R組成；

所述探針A1為檢測SMN1基因第7外顯子的探針SMN1-EX7-P，其核苷酸序列如SEQ IDNo.5所示；

所述探針A2為檢測SMN2基因第7外顯子的探針SMN2-EX7-P，其核苷酸序列如SEQ IDNo.6所示；

所述單鏈DNA組B由引物對B、探針B1和探針B2組成；

所述引物對B為特異性檢測SMN1基因和SMN2基因第8外顯子的共用引物，由SEQ IDNo.3所示的上游引物SMN-EX8-F和SEQ ID No.4所示的下游引物SMN-EX8-R組成；

所述探針B1為檢測SMN1基因第8外顯子的探針SMN1-EX8-P，其核苷酸序列如SEQ IDNo.7所示；

所述探針B2為檢測SMN2基因第8外顯子的探針SMN2-EX8-P，其核苷酸序列如SEQ IDNo.8所示。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒還含有單鏈DNA組C；所述單鏈DNA組C由引物對C和探針C組成；

所述引物對C為特異性檢測內參基因的引物對；

所述探針C為檢測所述內參基因的探針。

3.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于：所述引物對C為檢測內參基因PRR30的引物對，由SEQ ID No.9所示的上游引物PRR30-F和SEQ ID No.10所示的下游引物PRR30-R組成；

所述探針C為檢測內參基因PRR30的探針PRR30-P，其核苷酸序列如SEQ ID No.11所示。

4.根據權利要求1-3中任一所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒中還含有對照品；

所述對照品為對照品A、對照品B或對照品C：

所述對照品A由DNA片段A1、DNA片段A2和DNA片段C組成；或者由含有所述DNA片段A1的質粒A1、含有所述DNA片段A2的質粒A2和含有所述DNA 片段C的質粒C組成；

所述DNA片段A1為SMN1基因第7外顯子，其核苷酸序列為SEQ ID No.12；所述DNA片段A2為SMN2基因第7外顯子，其核苷酸序列為SEQ ID No.13；所述DNA片段C為所述內參基因片段；

所述對照品B由DNA片段B1、DNA片段B2和所述DNA片段C組成；或者由含有所述DNA片段B1的質粒B1、含有所述DNA片段B2的質粒B2和所述質粒C組成；

所述DNA片段B1為SMN1基因第8外顯子，其核苷酸序列為SEQ ID No.14；所述DNA片段B2為SMN2基因第8外顯子，其核苷酸序列為SEQ ID No.15；

所述對照品C由所述DNA片段A1、所述DNA片段A2、所述DNA片段B1、所述DNA片段B2和所述DNA片段C組成；或者由所述質粒A1、所述質粒A2、所述質粒B1、所述質粒B2和所述質粒C組成。

5.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于：所述DNA片段C為內參基因RPP30的片段，其核苷酸序列為SEQ ID No.16。