[發明專利]一種抗蛋白酶3抗體測定試劑盒及其測定方法

在審

• 申請號: 202011213899.7
• 申請日: 2020-11-04
• 公開（公告）號: CN112379103A
• 公開（公告）日: 2021-02-19
• 發明（設計）人: 劉海健;李堅;程光亮;李青梅
• 申請（專利權）人: 上海賽罕生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/58;G01N33/564
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種抗蛋白酶3抗體測定試劑盒及其測定方法，Anti?PR3IgG?R1試劑，Anti?PR3IgG?R2試劑，Anti?PR3IgG磁分離試劑，Anti?PR3IgG校準品。本發明是將間接化學發光免疫分析法和磁微粒分離技術相結合的一種測定方法，用于體外定量測定人血清中抗蛋白酶3抗體IgG的含量，來對局限于腎臟的小血管炎和Churg?Strauss綜合征等該種小血管性血管炎進行檢測。

技術領域

本發明涉及醫療檢測技術領域，具體為一種抗蛋白酶3抗體測定試劑盒及其測定方法。

背景技術

蛋白酶3(Proteinase3，PR3)是中性粒細胞胞漿嗜天青顆粒中的一種絲氨酸蛋白酶，分子量約為29KDa的糖蛋白。PR3能降解多種細胞外基質如彈性蛋白、血紅蛋白、IV型膠原等多種組織成分。此外，蛋白酶3通過組織蛋白酶G促進血小板活化，并使C1抑制劑失活。

韋格納肉芽腫(Wegener′sgranulomatosis，WG)是一種特殊類型的壞死性肉芽腫性血管炎。其臨床的復雜性和診治的困難性一直是困擾風濕病專科醫師的問題。WG的診斷主要依據臨床癥狀，而臨床表現復雜多樣、因人而異。抗中性粒細胞胞漿抗體(ANCA)是對WG最有診斷意義的自身抗體。ANCA產生的熒光模式包括胞漿型(cANCA)、核周型(pANCA)。過去WG的診斷主要是根據典型的臨床表現和病史，但有些患者，尤其是限局性的患者很難診斷，病檢是確診WG的重要手段。但一次或單部位病檢陰性并不能排除WG。目前的研究認為大部分WG患者的ANCA特異性靶抗原是PR3，抗PR3抗體與WG的診斷和疾病活動密切相關。胞漿型ANCA(cytoplasmicANCA，cANCA)和抗 PR3抗體對WG診斷意義有高度的敏感性和特異性。國外報道在活檢證實為WG的患者中，抗PR3抗體特異性為90％以上。敏感性是與疾病的活動性有關。通常抗PR3抗體滴度與疾病活動一致，活動性WG 患者在病變尚未影響到呼吸系統時抗PR3抗體敏感性是65％，當患者出現呼吸系統、腎臟損害時其靈敏度達90％以上。活動期滴度較高，部分緩解期滴度很低，完全緩解的患者多數測不到。緩解期抗PR3抗體滴度的升高可能預示著復發，并且有助于將感染和復發區分開。對于此病的檢測方法主要為間接免疫熒光法和酶聯免疫吸附法，但這些方法都存在著不足之處。

發明內容

為解決現有技術存在的缺陷，本發明提供一種抗蛋白酶3抗體測定試劑盒及其測定方法。

為了解決上述技術問題，本發明提供了如下的技術方案：

本發明一種抗蛋白酶3抗體測定試劑盒，包括Anti-PR3IgG-R1 試劑，Anti-PR3IgG-R2試劑，Anti-PR3IgG磁分離試劑，Anti-PR3IgG 校準品；

所述的Anti-PR3IgG-R1試劑的內容物為含有生物素標記的濃度為0.5μg/ml的PR3抗原，0.5％的牛血清白蛋白以及0.1mol/L、pH8.0 的Tris緩沖液；所述的Anti-PR3IgG-R2試劑的內容物為含有ALP標記的濃度為0.5μg/ml的羊抗體多克隆抗體，3.0％的牛血清白蛋白以及0.1mol/L、pH7.5的Tris緩沖液；所述的Anti-PR3IgG磁分離試劑的內容物為含有鏈霉親和素標記的的濃度為0.5mg/ml的磁性微粒， 0.5％的牛血清白蛋白以及0.1mol/L、pH8.0的Tris緩沖液； Anti-PR3IgG校準品；所述的Anti-PR3IgG校準品的內容物為含有一定濃度的抗PR3抗體IgG，3.0％的牛血清白蛋白和0.1mol/L、pH7.5 的Tris緩沖液。

一種抗蛋白酶3抗體測定試劑盒的測定方法，一種抗蛋白酶3抗體測定試劑盒的測定方法，其特征在于，包括以下幾個步驟，

步驟1：加入20μL校準品、質控品或待測標本至檢測管中，其中待測標本按照1：:2倍進行預稀釋；

步驟2：加入50μL的Anti-PR3IgG-R1試劑至檢測管中，混勻后，在37±0.5℃溫育15分鐘；