[發(fā)明專利]一種不結球白菜抗霜霉病種質材料的鑒定方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011210978.2
• 申請日: 2020-11-03
• 公開（公告）號: CN112301090A
• 公開（公告）日: 2021-02-02
• 發(fā)明（設計）人: 朱紅芳;劉素莎;李曉鋒;朱玉英;奚丹丹;高璐
• 申請（專利權）人: 上海市農業(yè)科學院
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18;C12R1/645
• 代理公司: 深圳深瑞知識產權代理有限公司 44495
• 代理人: 劉慧玲

本發(fā)明公開了一種不結球白菜抗霜霉病種質材料的鑒定方法，包括如下步驟：步驟1，配制霜霉病菌懸浮液，收集霜霉病發(fā)病葉片，洗凈后置于20℃黑暗條件下保濕，24h后剝落于蒸餾水中制成霜霉病菌懸浮液并置于?20℃條件下保存；步驟2，培育供試品種的白菜，在不結球白菜的幼苗長到兩葉一心時期，將前述配制的霜霉病菌懸浮液滴點在不結球白菜的葉面；步驟3，將前述滴點后的幼苗置于18～20℃，相對濕度為95％～100％的培養(yǎng)箱內進行培養(yǎng)，在7d后統(tǒng)計，鑒定篩選感病和不感病的不結球白菜植株。本發(fā)明屬于農業(yè)技術領域，試驗中發(fā)現鑒定品種材料的抗性較適宜的苗齡是3～4片真葉期，具體是指一種能快速、有效地鑒定不結球白菜抗霜霉病的鑒定方法。

技術領域

本發(fā)明涉及農業(yè)領域，特別涉及一種不結球白菜抗霜霉病種質材料的鑒定方法。

背景技術

白菜霜霉病(peronaspora parasitica)是白菜上最重要的病害之一，在十字花科蔬菜上的危害程度僅次于病毒病，遇病害重發(fā)年份，其危害程度大大超過病毒病，是秋季及初冬白菜生產上的一個重大威脅。白菜霜霉病為十字花科霜霉病菌侵染所致，主要為害葉片，病葉最初出現黃色斑點，后轉為淺褐色多角形斑點，在潮濕的環(huán)境條件中，病葉背面常可見到白色的霉狀物。不結球白菜(Brassic campestris ssp.chinensis Makino)又名小白菜、青菜，屬十字花科蕓薹屬，因其品質柔嫩、風味獨特、營養(yǎng)豐富等特點，在人民生活中占有重要的地位，特別在上海、長江中下游及以南地區(qū)，不結球白菜是人們不可缺少的大眾化蔬菜之一。

霜霉病由真菌中的霜霉菌引起的植物病害，對不結球白菜的危害極大，已經影響其從幼苗期到成熟期的整個生長階段，造成品質以及產量上不可估量的損失。病原體為寄生型霜霉，屬鞭毛菌亞門，為卵菌綱，霜霉屬。

傳統(tǒng)的殺菌劑不僅開發(fā)成本大，而且對環(huán)境的承載能力也是一個巨大的挑戰(zhàn)，期間病菌產生的抗藥性又會減少藥效，但是，現有的鑒定方法無法保存或繁殖菌源及比較品種材料的抗性差異，獲得抗源，為此，我們提出一種不結球白菜抗霜霉病種質材料的鑒定方法來解決上述問題。

發(fā)明內容

為了克服現有技術的不足，本發(fā)明提供了一種通過點滴法對培育的白菜幼苗進行霜霉病菌接種，對接種后白菜是否感染霜霉病進行鑒別，從而判斷不結球白菜是否具備抗霜霉病的特質的不結球白菜抗霜霉病。

本發(fā)明的上述技術目的是通過以下技術方案得以實現的：

一種不結球白菜抗霜霉病種質材料的鑒定方法，包括如下步驟：

步驟1，配制霜霉病菌懸浮液，收集霜霉病發(fā)病葉片，洗凈后置于20℃黑暗條件下保濕，24h后剝落于蒸餾水中制成霜霉病菌懸浮液并置于-20℃條件下保存；

步驟2，培育供試品種的白菜，在不結球白菜的幼苗長到兩葉一心時期，將前述配制的霜霉病菌懸浮液滴點在不結球白菜的葉面；

步驟3，將前述滴點后的幼苗置于18～20℃，相對濕度為95％～100％的培養(yǎng)箱內進行培養(yǎng)，在7d后統(tǒng)計，鑒定篩選感病和不感病的不結球白菜植株。

進一步地，所述步驟2中不結球白菜的培育方式為：將供試品種播于穴盤中，穴盤中的基質為蛙石和泥炭以1:3比例混合而成的，高溫滅菌后使用，待植株兩片子葉平展時，即播種7d后，將配好的新鮮菌液進行滴液接種，接種量為每株150～200μl，接種后黑暗保濕24h，每個處理3次重復，每重復苗數20～30株。

進一步地，所述步驟2中不結球白菜接種霜霉病的方式為：當穴盤中的不結球白菜幼苗長到兩葉一心時，進行接種，并置于18～20℃，相對濕度為95％～100％的培養(yǎng)箱內進行培養(yǎng)，在7d后統(tǒng)計，鑒定篩選感病和不感病的不結球白菜植株。

進一步地，所述步驟1中配制的濃度為每視野10mm×10mm具有4～5個孢子囊的懸浮菌液。